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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
在2-8度冷藏保存, 避免光照
- 保质期:
6个月
- 英文名:
ReadiUse™ PE [R-Phycoerythrin] *Ammonium Sulfate-Free*
- 库存:
1
- 供应商:
西安百萤
ReadiUse PE [R-藻红蛋白] *无硫酸铵*
| 货号 | 2500 | ||
| 规格 | 1 mg | ||
| Ex (nm) | 564 | Em (nm) | 574 |
| 分子量 | ~240000 | 溶剂 | Water |
适用范围
能够快速与抗体及链霉亲和素等多种蛋白、二级试剂等实现高效偶联
产品介绍
R-藻红蛋白(PE)提取自红藻,其主吸收峰位于565纳米,次吸收峰分别位于496纳米和545纳米。目前市售的PE产品均储存于高浓度硫酸铵缓冲液中,而其他品牌的产品在用于标记实验前需经过繁琐的透析或其他纯化步骤。
AAT Bioquest公司推出的这款即用型PE无需任何纯化处理即可直接用于各类标记实验。我们精心纯化的即用型PE能够快速与抗体及链霉亲和素等多种蛋白、二级试剂等实现高效偶联。
注:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验PriCells: 藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE-标记蛋白A方法
藻红蛋白标记抗体的方法:1. 巯基化藻红蛋白(PE)的制备;(1)将600μl浓度为15.5mg/ml的盐酸巯醇亚胺加到1.2ml浓度为3.6mg/ml的PE中;(2)将以上混合液和1.2ml pH6.8的PB混合,而后装入透析袋置入50mmol/L pH6.8的PB中于4℃透析,过夜;(3)再换用pH7.5 PB透析6h。每个PE分子中可结合8个巯基;2. 巯基PE-IgG的制备;(1)将30μl浓度为1.1mg/ml的异双功能试剂SPDP的乙醇溶液,加入到700μl
稀释液为pH4.5。 2、室温下边搅拌(磁力搅拌器或电功搅拌器),边缓慢滴加辛酸(25ml/L血清稀释液),滴加完后继续搅拌30min。 3、离心(10000r/min,30min),收集上清夜,弃去沉淀。 4、上清液用多层纱布过滤。 5、按1/10体积加入10×PBS,用5mol/L NaOH调至PH7.4。 6、上清液4℃预冷,计算溶液总体积,在4℃按277g/L加入硫酸铵粉沫(45%饱和度),边加边搅拌,加完后继续搅拌30min。 7、离心(5000r/min,15min)),弃去上清
上述混合液加0.2778固体硫酸钱,40度搅拌30分钟,以4000-6000r/min离心巧一20分钟,将沉淀溶于少量YBS,透析,测蛋白含量,冻存。(3)硫酸铵沉淀法按常规方法将腹水分别经50%,33%饱和度硫酸铵沉淀。(4)亲合层析取提取的样品,用0.01lmol/ L Na2HPO4 (pH7.4)透析,洗脱使样品中IgG结合于层析柱上,再用0. lmol/ L柠檬酸(pH4.0)洗脱,收集洗脱液即获纯化IgG。(5)SDS—PAGE电泳鉴定抗体纯度(6)间接ELISA法测定抗体效价用sIgA
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