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- GOY-K14165
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原：
详见说明书
- 亚型：
IgG
- 形态：
详见说明书
- 保存条件：
低温冷藏
- 克隆性：
多克隆
- 应用范围：
详见说明书
- 浓度：
1mg/1ml
- 抗体英文名：
Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) (C67C8) Rabbit mAb
- 抗体名：
Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) (C67C8) Rabbit mAb
1.材料与试剂
a．提取的动物 Ig
b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c．青霉素和链霉素
d．实验动物 兔
e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）
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实验原理 :
（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。
（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
（6）抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) (C67C8) Rabbit mAb抗体的制备过程：
1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物：常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集：一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定：得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存：抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
我司提供以下技术外包服务:
1.分子生物学：质粒抽提、PCR、Q-PCR、RT-PCR、分子生物学：基因合成、引物合成、基因测序、载体构建等
2.蛋白工程：原核、哺乳动物蛋白表达系统等
3.病毒包装：腺病毒、慢病毒等
4.抗体工程：磁珠分选、病理染色、WB、ELISA、IP、IF、IHC、FACS、Confocal等等
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文献和实验) is accompanied with or inactivates the GSK activity. However, it is still not conclusive what the role of Tyr phosphorylation (Y216 fro beta, Y279 for alpha) on GSK activity is. One reference is a review paper published in Cell in 2001, you may take a quick
。所以，我们建议使用微波炉或高压锅加热煮沸以达到最佳抗原修复效果。抗体：Phospho–Stat3 (Tyr705)(D3A7) XP. Rabbit mAb #9145样本：石蜡包埋人类肺部肿瘤样本煮沸设备：浴锅 (左)，微波炉 (中)，高压锅 (右)免疫染色—封闭在 IHC–P 中，我们建议在室温下在含有 Tween20 的 TBST 缓冲液和 5% 正常山羊血清 (NGS) 中封闭样品，时长 1 小时，以防止非特异性背景染色。在进行 IHC–F 时，在含有 0.3% Triton. X–100 的 1X
h）即可。2. 修复大法——不仅仅是「煮一煮」微波炉修复：简单易行效果好，CST 推荐使用微波炉完成修复。合适的修复液：根据抗体说明书使用合适的修复液。用柠檬酸修复后，切片需浸泡在修复液中，自然冷却；而用 EDTA 修复后，切片可直接从修复缸中取出，直接进行下一步。注：使用不同的修复方式和不同生产商的抗体检测人肺癌组织中 EGFR 的表达。第一排为 CST 的 EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb（#4267），EDTA 的修复方式明显优于柠檬酸盐及胃蛋白
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