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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
HUVEC-GFP
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | HUVEC-GFP |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-3216 |
| 中文名称: | HUVEC-GFP |
| 细胞数量: | 1*10^6 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件: | Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
| 细胞冻存: | Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%(for reference)Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞运输: | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶) |








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文献和实验dingxiangyua 有哪位高手知道F-GFP和GFP-actin的抗性分别是什么?急求 Fasta921 定位在膜上的GFP (F-GFP) 绿荧光蛋白(GFP)标记肌动蛋白(GFP-Actin) 抗性?不明白! biyuntian478 lz是啥意思? 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验
【共享】如何检测GFP、GFP、YFP、EYFP、CFP抗体?
检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP的GFP抗体GFP是绿色萤光蛋白(Green Fluorescent Protein)的简称,由238个氨基酸残基组成。GFP蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。GFP或其突变体EGFP标签系统等被广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分布。我们都知道GFP抗体能应用于GFP的表达检测、纯化
溶液以及器材: 1、用RPMI-1640配I型胶原酶 0.1g/100ml 2、配三抗: 青霉素:100ku/L 链霉素:100ku/L 庆大霉素:100ku/L 3、培养液(M199+ECGS[3ug/ml]+15%胎牛血清)有EGF可以适当加点10ng/ml 4、大瓶生理盐水 5、广口瓶(脐带数+1) 6、止血钳(脐带数×2+2) 7、大针头数个(用于吸取生理
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