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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
在2-8度冷藏保存, 避免光照
- 保质期:
24个月
- 库存:
1
- 供应商:
西安百萤生物科技有限公司
- 规格:
2 Labelings
产品介绍
APC-iFluor® 700 串联染料是APC-Alexa Fluor® 700 串联染料的替代品,主要用于标记抗体 ,因两者光谱几乎完全一致。在某些抗体上,我们的APC-iFluor® 700 串联染料比APC-Alexa Fluor® 700具有更高的荧光亮度(Stain Index)。AAT Bioquest 提供这款Buccutite™ 快速标记试剂盒,可轻松实现APC-iFluor® 700 串联染料与抗体、链霉亲和素及其他二抗偶联。
Buccutite™ APC-iFluor® 700 串联偶联试剂盒提供了一种稳定便捷的方法,用于将抗体与APC偶联。该试剂盒包含预活化的APC-iFluor® 700 串联染料及反应缓冲液,偶联后的抗体可应用于流式细胞术(Flow Cytometry)、Western Blot(WB)、ELISA 及免疫组化(IHC)。每盒可进行2 次标记反应,每次最多可标记25 μg 抗体。不同抗体的最佳标记比例需通过实验优化确定。
本试剂盒提供的预活化 APC-iFluor® 700 串联染料可快速与抗体、链霉亲和素等蛋白偶联,其偶联效率远高于传统繁琐的SMCC 化学偶联法。此外,我们的预活化染料通过蛋白氨基(-NH₂)进行偶联(蛋白中氨基含量丰富),而SMCC 化学法则依赖巯基(-SH)(需通过抗体还原再生),进一步提升了标记的便捷性和效率。
实验方案
1.向25 µl抗体溶液中加入1.25 µl反应缓冲液(组分C)
2.抗体混合液加入Buccutite™ MTA冻干粉(组分B)
3.室温孵育30分钟
4.加入50 µl Buccutite™ FOL活化APC-iFluor 700(组分A)
5.室温继续孵育60分钟
注:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其它非科研用途!
百萤生物公司简介
美国AAT Bioquest公司长年以来与百萤生物互补优势,为国内外广大用户提供光谱检测,底物显色,荧光发光技术等全系列解决方案。近年来,百萤生物已与多家药企、CRO公司、众多高校及科研单位建立了长期稳定的合作关系;我们的服务宗旨:为广大科研用户提供更好的服务.
1.更高品质保障的AAT Bioquest产品(AAT Bioquest作为专业的光谱学检测产品生产商,能提供 高性价比的产品)。
2.更低的价格和高性价比的选择,我们将一如既往的为客户和代理商提供全面的售后保障。作为全国代理,百萤生物给您优惠的折扣和专业的技术支持。
重要保存说明:
1.试剂盒需4℃保存(有效期6个月),组分B可-20℃冻存
2.禁止冷冻组分A(活化APC-iFluor 700)与组分C(反应缓冲液)
3.使用前需室温平衡所有组分,短暂离心后立即配制工作液
注:本方案以标记羊抗小鼠IgG抗体为例。
抗体工作液配制
抗体浓度1 mg/mL时
取25 μL抗体溶液(含25 μg抗体)加入1.25 μL反应缓冲液(组分C,占总反应体积5%)
注意事项
1.浓度调整:若抗体浓度≠1 mg/mL,需调整体积确保投入~25 μg抗体
2.抗体应溶解在1X磷酸盐缓冲盐水(PBS),pH 7.2-7.4;如果抗体溶解在甘氨酸缓冲液中,必须用1X PBS,pH 7.2-7.4透析,或者使用ReadiUse™ 10KD离心过滤器(Cat. # 60502 from AAT Bioquest)去除游离胺或铵盐(如硫酸铵和乙酸铵)
3.避免含BSA/明胶的抗体
4.抗体浓度<1 mg/mL会显著降低Buccutite™ MTA反应效率
5.推荐工作浓度1-10 mg/mL
Buccutite™ MTA工作液配制
向Buccutite™ MTA(组分B)的小瓶中加入10 µLDMSO(DMSO,本品未提供)。
Buccutite™ FOL活化APC-iFluor 700工作液配制
向Buccutite™ FOL活化APC-iFluor 700(组分A)的小瓶中加入50 µL ddH2O
抗体-Buccutite™ MTA反应步骤
1.将抗体工作液直接加入Buccutite™ MTA(组分B)管中,通过反复吹吸或短暂涡旋(约5-10秒)充分混匀
2.室温(25±2℃)静置反应30-60分钟
注:可根据需求延长旋转或振荡孵育时间
抗体-APC-iFluor 700偶联制备
1.加入Buccutite™ FOL活化APC-iFluor 700工作液与抗体,通过过反复吸吹几次或漩涡振荡几秒钟来充分混合。
2.培养1-2小时
3.抗体-APC-iFluor 700偶联物现已准备好使用
注:如需立即使用,抗体-APC-iFluor 700偶联物需要稀释到您选择的缓冲液中。
抗体-APC-iFluor 700偶联物保存
浓度要求:≥0.5 mg/mL(需添加0.1% BSA等载体蛋白)
短期保存:4℃避光
长期保存:冻干后≤-20℃储存
注意事项
避免反复冻融
使用前需离心去除潜在沉淀
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验SE 活性部分远低于50%(AlexaFluor488微量标记试剂盒产品信息,Invitrogen)。相反,所有Biotium 的CF染料具有相对稳定的胺活性的SE基团型,这比大部分AlexaFluor 染料的SE更耐水解。总体来说,CF染料SE产品一贯的给出更高的标记效率,提供给用户更好的使用价值。选择方案:蓝色(350-450nm处激发) CF 350、Alexa Fluor 350、AMCA等----亮蓝和紫外光激发CF350是类似于Alexa Fluor 350和传统荧光染料AMCA的蓝色
: Type 1 (used for FITC, Cy5, and the initial preparation of the Cy5 and Cy7 tandem dyes); Type 2 (used for Biotin and Cascade Blue); Type 3 (used for conjugation of PE, APC, TR-BSA, and their derivatives); and Type 4 (used for the initial preparation
dyes. The conjugations fall into four basic protocols: Type 1 (used for FITC, Cy5, and the initial preparation of the Cy5 and Cy7 tandem dyes); Type 2 (used for Biotin and Cascade Blue); Type 3 (used for conjugation of PE, APC, TR-BSA
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