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西安百萤生物科技有限公司
BrdUTP*10 mM溶于 TE Buffer*细胞增殖检测 CAS 102212-99-7
| 货号 | 17031 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 100 ul | ||
| Ex (nm) | Em (nm) | ||
| 分子量 | 612.98 | 溶剂 | Water |
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
BrdUTP是美国AAT生产的用于细胞增殖的产品,BrdUTP可用于掺入DNA,以用于随后的抗BrdU抗体检测。BrdUTP掺入DNA也是引入随机突变的工具。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的细胞增殖检测试剂/试剂盒。
产品说明书
用于染色细胞的样品方案
1)根据需要准备细胞,并用4%甲醛固定细胞。
2)将细胞沉淀(0.5–1×10 6个 细胞)重悬于50μL的溶液中,该溶液包含:
-
- 10μL的1 M钾(或椰油酸钠),125 mM HCl,pH 6.6和1.25 mg / mL BSA。
- 0.5μL的10 mM BrdUTP。
- 0.5μL(12.5单位)TdT。
- 5μL的10 mM CoCl 2 溶液。
- 35μL蒸馏水H 2 O
3)在37°C下孵育细胞40分钟至1小时。
4)用PBS冲洗细胞。
5)将细胞重悬于100μL荧光抗BrdU抗体溶液中(例如, iFluor 647共轭)
6)在室温下孵育1小时。
可选:如果需要,添加碘化丙啶(或DAPI)以染色细胞核。
7)通过流式细胞仪分析细胞。
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文献和实验Authors: Yousuke Oka, Yoshito Akagi, Tetsushi Kinugasa, Nobuya Ishibashi, Nobutaka Iwakuma, Ichitarou Shiratsuchi, Kazuo Shirouzu
Journal: Anticancer research (2013): 2887--2894
果糖才是肥胖的真凶?Nature 最新文章揭示高果糖饮食如何
)增加还是细胞数量增加导致的,作者在几个不同的时间点使用 5-溴-2'-脱氧尿苷(BrdU)和 5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)注射进行了单标记和双标记追踪实验。这些测定结果表明,与对照组小鼠相比,HFCS 处理小鼠的十二指肠绒毛具有相似的迁移率,但存活时间超过 72 小时的肠上皮细胞是对照小鼠的两倍多。通过组织学 Ki-67 染色评估的细胞增殖也表现出一致的结果。这些数据表明细胞存活是果糖处理条件下绒毛肥大的主要决定因素。图片来源:Nature在缺氧的 HCT116 细胞中,糖酵解中间体增加
Detection of DNA Strand Breaks in Apoptotic Cells by Flow- and Image-Cytometry
with fluorochromes, defined as the TUNEL assay. This chapter describes the variant based on DSBs labeling using 5-Bromo-2′-deoxyuridine-5′-triphosphate (BrdUTP) as a TdT substrate and the incorporated BrdU is subsequently detected immunocytochemically with anti
-2)是:在细胞培养过程中,加入5-溴脱氧尿苷,当细胞的DNA复制时,Brdu可作为核苷酸前体物专一取代胸腺嘧啶而被掺入到新合成DNA链中。第二周期加入BrdU,每条新合成的染色单体DNA双链中旧模板没有掺入,半保留复制的新链被BUdR掺入;当细胞处于第三个分裂周期时,同一染色体的两条姐妹染色单体,一条由双股都含有BrdU的DNA链构成,而另一条为单股含有BrdU的DNA链。在结构上双股含BrdU的DNA螺旋化程度降低,故对染色剂亲和力低,在用Giemsa染色时着色浅,只有单股含BrdU的DNA链组成的单体
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