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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
53
- 英文名:
GSH and GSSG Assay Kit
- 保质期:
有效期一年
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
共100次
GSSG和GSH检测试剂盒 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
中文名称:GSSG和GSH检测试剂盒
英文名称:GSH and GSSG Assay Kit
产品规格:共100次
发货周期:1~3天
本试剂盒是一种简单易行的可以分别检测出GSH(还原型谷胱甘肽)和GSSG(氧化型谷胱甘肽)含量的检测试剂盒。
通过谷胱甘肽还原酶把GSSG还原成GSH,而GSH可以和生色底物DTNB反应产生黄色的TNB和GSSG。适当配制反应体系,前后两个反应合并起来后,总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个颜色产生的限速因素,总谷胱甘肽的量就决定了黄色的TNB形成量。从而通过测定A412就可以计算出总谷胱甘肽的量。用适当试剂先清除样品中的GSH,然后利用上述反应原理就可以测定出GSSG的含量。用总谷胱甘肽(GSSG+GSH)的量扣除GSSG的含量,就可以计算出GSH的含量。
本试剂盒的具体反应原理如下:
两个反应相合并:
还原型谷胱甘肽是绝大多数活细胞中巯基的主要来源,对于维护蛋白巯基适当的氧化还原状态有重要作用,并且是动物细胞中关键的抗氧化剂。总谷胱甘肽中通常90-95%为还原型谷胱甘肽。
本试剂盒可以检测动物组织、血浆、红细胞、和培养细胞或其它适当样品中GSH和GSSG的含量。 本试剂盒提供了蛋白去除试剂M,可以更加准确地测定出含有蛋白的样品中的GSH和GSSG的量。 本试剂盒的检测下限为0.5微摩尔/升。一个试剂盒共可以进行100次检测,可以测定100个样品的总谷胱甘肽或GSSG的含量,或可以测定出50个样品中GSH和GSSG的各自含量。
试剂盒组分:
总谷胱甘肽检测缓冲液——————60ml
谷胱甘肽还原酶—————————150μl
氧化型谷胱甘肽 (GSSG)——————5mg
DTNB——————————————4.5mg
蛋白去除试剂M——————————1g
NADPH——————————————4mg
DMSO———————————————1.5ml
GSH清除辅助液——————————0.8ml
GSH清除试剂———————————160μl
储存条件:-20℃,有效期一年。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
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文献和实验A Rapid Method for the Quantification of GSH and GSSG in Biological Samples
(GSSG) are biologically important intracellular thiols, and alterations in the GSH/GSSG ratio are often used to assess exposure of cells to oxidative stress. GSH plays an important role in scavenging free radicals and protects cells against several toxic
GSH和GSSG 参照 Anderson等 (1992)。取0.5 g样品,加入3 mL冰冷的6%的偏磷酸(含1 mmol•L-1 EDTA , pH 2.8),冰浴研磨,匀浆液以20,000 g,4 ℃离心15 min,取上清液来马上测定GSH和GSSG的含量或储存在-20 ℃下等待测定。总的GSH和GSSG含量测定如下:200 μL提取液加 1.2 mL反应液包含400 μL反应液1(110 mmol•L-1 Na2HPO4•7H20, 40 mmol•L-1 NaH2PO4•H2
Cell Reports:复旦大学孙宁 / 李晓波团队发现 β-羟基丁酸对铁死亡的表观遗传学调控
代谢组检测。结果发现,GSH 合成的三种重要氨基酸底物显著降低,通过 GSH/GSSG 含量测定以及 4-HNE 染色,作者确定了 ALF 小鼠的胰腺中存在铁死亡的发生。接下来作者发现,在肝脏、血浆、及胰腺组织的代谢物变化中,共同降低的代谢物只有一种,即 β-HB。 那么,β-HB 与铁死亡之间是否存在相关呢?作者首先在体外进行了实验,结果显示,β-HB 能够显著抑制胰腺细胞系以及外分泌类器官的铁死亡。作者随后将 β-HB 以渗透泵的方式持续对 ALF 小鼠进行给药,结果发现,β-HB 能够显著
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