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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
零下20度
- 保质期:
2年
- 库存:
100
- 供应商:
上海信帆生物科技有限公司
- 抗体英文名:
HRP*Polyclonal Goat Anti- Human Ig
- 规格:
1ml
荧光素标记:
荧光色素是常用于标记抗体的标记物之一。荧光素经恰当的激发可发光,从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况,主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色,是一种非常好的亚细胞水平精确定位的方法。
HRP标记:
根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备HRP结合物,可用戊er醛二步法。
FITC标记:
免疫荧光技术是将荧光素如异硫青酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体(或抗原)以化学的方法结合,将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知的抗体(或抗原)即可推知另一个未知抗原(或抗体)的存在。
BIOTIN标记:
生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末发展起来的一种生物反应放大系统。随着各种生物素衍生物的问世,BAS很快被广泛应用于医学各领域。近年大量研究证实,生物素—亲和素系统几乎可与目前研究成功的各种标记物结合。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大效应,使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。它已成为目前广泛用于微量抗原、抗体定性、定量检测及定位观察研究的。
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文献和实验本法是以 NaIO 4 先将 HRP 表面的糖分子氧化成醛基,然后再与 Ig 上的氨基相结合,所获酶标记抗体的产率高,将近 70 %的 HRP 和 Ig 结合, 99 %的 Ig 与酶结合,酶与 Ig 的活性无重大损失,是目前最常用的方法。 1. 原理:经典的过碘酸钠法中需采用二硝基氟苯封闭 HRP 上残留的α - 和ε氨基基以避免酶分子之间的交联。后来 Wilson 等改用在低 PH 下使 NaIO 4氧化 HRP ,从而省去了二硝基氟苯封闭 HRP 步骤
蛋白质印迹免疫分析(Western Blot Anglysis)
自显影或原位酶反应来确定抗原—抗体—抗抗体复合物在滤膜上的位置和丰度。 【器材】 转移电泳仪 ,硝酸纤维素膜,滤纸,剪刀,手套,小尺 【 试剂 】 1.IgG 标准品 2.羊抗人辣根过氧化物酶(HRP)标记的IgG 抗体 3.转移buffer:Tris 3.03g,Gly14.4g,甲醇200ml,加三蒸水至1000ml充分溶解,4℃
Mol/L PBS 含0.05% Tween 203. 封闭液: 3%BSA(用洗涤液配制)4. 酶标抗体的稀释:用封闭液稀释5. OPD底物Buffer:Na2HPO4.12H2O 1.84g柠檬酸 0.51gDDW 100ml6. 显色液(现配现用):底物Buffer 10mlOPD 2mg30% H2O2 2ml7. 终止液 2Mol/L H2SO48. 重组人TFAR19, HRP标记的羊抗人IgG9. ELISA板, Tip, 移液器,ELISAReader(OD490nm),洗板机操作
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