- ￥6000
- MB
- 11--1025
- 2026年01月06日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Venor® Gem Classic
| 货号 | 品名 | 规格 | 价格 |
| 11-1025 | 支原体常规PCR检测试剂盒（经典法）（不含Taq酶） Venor® Gem Classic |
25次/盒 | 询价 |
| 11-1050 | 50次/盒 | 询价 | |
| 11-1100 | 100次/盒 | 询价 | |
| 11-1250 | 250次/盒 | 询价 |
特点
1.内控对照为独立包装，遵循欧洲药典和日本药典操作流程。
2.高特异性，仅一条阳性对照条带，即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。操作简单，
易于观察。
3. 高灵敏度，若PCR反应体系加入10μl样本，支原体检测限度为≤5或≤10CFU。
(详见下文“(2)Venor® Gem Classic Kit 10种常见支原体检测限“)
4.欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体，与细菌和真核DNA无交叉反应。
5.试剂盒中不含Taq酶，可另外购买。推荐使用德国MB公司专用Taq酶。(货号: 53-1050)
Venor® Gem Classic Kit
10种常见支原体检测限
| 物种 | 检测限 [CFU/ml] |
物种 | 检测限 [CFU/ml] |
| 莱氏无胆甾原体 | ≤5 | 肺炎支原体 | ≤10 |
| 猪鼻支原体 | ≤10 | 精氨酸支原体 | ≤10 |
| 发酵支原体 | ≤10 | 鸡败血支原体 | ≤10 |
| 口腔支原体 | ≤10 | 螺原体 | ≤10 |
| 关节液支原体 | ≤10 | 唾液支原体 | ≤10 |
操作步骤
第1步：样本处理
a. 细胞培养上清
b. 生物药或需遵循药典的样本
说明：①样品基质可能会影响检测的灵敏度。收集和筛选更高的样品量可提高测定灵敏度。
②细胞培养物样本含丰富的DNA酶，在低温下也能降解支原DNA，影响检测灵敏度。
建议：样本做DNA抽提处理，实现最高灵敏度。
推荐：德国MB公司生产的专用支原体DNA提取试剂盒，Venor® Gem Sample Preparation Kit。该DNA抽提试 剂盒已经过广泛验证。
第2步：试剂制备
第3步：PCR体系建立
a. 细胞培养上清
b. 生物药或需遵循药典的样本
第4步：启动PCR反应
第5步：电泳结果分析
191bp为内控对照条带，表明PCR反应正常。
当样本存在支原体污染时，由于内控对照与支原体DNA存在竞争，内控对照条带变弱（例如支原体DNA＞103拷贝）。
阳性对照中支原体DNA＞104拷贝，内控对照条带会完全消失。
可能在80-90bp存在引物自退火形成的条带，此条带不影响检测结果。
如果待测样本对PCR产生抑制，则内控对照条带变弱（和阴性对照相比），此时应先进行DNA抽提（推荐使用：Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原体DNA抽提试剂盒，详见第25页），然后再检测。
储存条件
2~8℃至少6个月。复溶后在-18℃保存。
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文献和实验光染料（如Hoechst染料）染色时，就可以在指示细胞的核周围观察到荧光斑点或荧光颗粒。DNA法则可以准确的将分离培养法不能检测的支原体M. hyorhinis菌株检测出来。国际支原体组织（IOM）推荐分离培养法和DNA荧光染色法作为常规检测方法。 但最近PCR法的发展令人鼓舞 ↓ 05 PCR检测法 PCR法检测支原体只需几个小时，是最快也是最灵敏的支原体检测方法。该方法采用针对支原体DNA的引物用PCR检测可疑样本，其中PCR引物通常针对支原体的16S rRNA基因。在凝胶电泳过程中
酶链反映法； 7、免疫学方法； 8 、支原体的培养。 对于支原体污染的细胞，可以采取补救措施： 1、抗生素排除法：可以用5-10倍于常用量的冲击法，加入高浓度抗生素后作用24-48小时，再换入常规培养液，有时可能有效。推荐用量：庆大霉素 200ug/ml ,四环素10ug/ml ，卡那霉素50ug/ml 。对于支原体污染抗生素应用，预防性应用比污染后使用好。 2、 加温除菌：根据支原体耐热性能差的特点。将受支原体污染的细胞置于41度中作用5-10小时可以杀灭支原体。但由于41度对培养
对你的实验有用。 首先，细胞来源支原体污染的最常见原因之一是引入的培养物已经被感染。一旦进入实验室，这些小东西会蔓延到每个角落，让你崩溃。要避免这种情况，最简单的办法就是不从其他实验室要细胞，而从供应商或菌种保藏中心购买，这些细胞经过严格检测，确保不含有支原体。如果购买有难度，或基于其他原因，不得不使用其他实验室的细胞，那么也要保持警惕，在单独的培养箱中隔离，同时进行支原体的检测。市场上有多家公司提供支原体检测试剂盒，你可自行选择。 其次，定期检测即使实验室没有新来的细胞，支原体也可能通过操作
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