- ￥7400
- Minerva-Biolabs®
- 11-8025
- 2026年01月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
25次/盒
常规PCR Kit （一步法）
Venor®Gem OneStep
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品名 |
货号 |
规格 |
价格 |
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常规PCR Kit （一步法） Venor®Gem OneStep |
11-8025 |
25次/盒 |
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11-8050 |
50次/盒 |
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11-8100 |
100次/盒 |
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11-8250 |
250次/盒 |
询价 |
常规PCR法介绍
常规PCR法：是根据支原体核糖体16s-23s rRNA的特异保守序列设计引物，对待检样本DNA进行扩增，通过对扩增产物的大小分析作出诊断。
优点：①灵敏度高，特异性好。②时间短，2-3小时出结果。③符合欧洲药典。④操作简单。
缺点：①对于已做支原体灭活处理的样品，由于支原体DNA仍旧存在其中，PCR结果会出现假阳性（可用培养法做补充验证）。②不同厂家生产的试剂盒质量差异巨大（由于引物及内在设计不同），需谨慎选择，尽量在专业人员推荐指导下使用。
『支原体常规PCR检测试剂盒』介绍
德国MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒，依据操作步骤的细微差别，分一步法和经典法两类。此两类试剂盒较全球其他厂家同类产品，具有以下独特的优点：
①符合欧洲药典要求。
②高特异性，一次检测即可涵盖了所有可能感染细胞的支原体物种（涵盖欧洲药典规定的9种支原体），根据序列一致性，至少可以检测到107种支原体物种。操作简单，易于观察（使用MB的试剂盒，下表中列出的支原体物种均为阳性，其他微生物或真核细胞均为阴性，无交叉反应）。
支原体PCR检测试剂盒（一步法）可检测物种
③高灵敏度，1-5拷贝/μl的支原体DNA即可检出。
④试剂盒含内控对照，可防止假阴性的发生。
支原体PCR检测试剂盒（一步法）适用范围
科研用户，细胞上清的筛查可选用MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒（一步法）。（详见下文）
【Venor® Gem OneStep (货号:11-8050)】或【Venor® Gem Advance (货号: 11-7096)】
B. 对于需遵循药典要求的生物制药企业，可选用MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒（经典法）。
【Venor® Gem Classic(货号: 11-1050) 】+ Taq酶 (货号: 53-1050)】
或【Venor® Gem Classic (货号: 11-1050G)】
支原体PCR检测试剂盒（一步法）特点
1. 内控对照已加在预混液中，无需另外配置，使用便捷。
2.高特异性，仅一条阳性对照条带，即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。
3.操作简单，易于观察。
4.高灵敏度，1-5拷贝/μl的支原体DNA即可检出。
5.欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体。
支原体PCR检测试剂盒（一步法）操作步骤
下列图示以Venor® Gem OneStep 支原体 常规PCR 检测试剂盒 (一步法)( 货号：11-8050) 为例，具体产品操作以说明书为准。
第1步：样本处理
第2步：试剂制备
第3步：PCR体系建立
第4步：启动PCR反应
第5步：电泳结果分析
191bp为内控对照条带，表明PCR反应正常。
当样本存在支原体污染时，由于内控对照与支原体DNA存在竞争，内控对照条带变弱（例如支原体DNA＞10^3拷贝）。
阳性对照中支原体DNA＞10^4拷贝，内控对照条带会完全消失。
可能在80-90bp存在引物自退火形成的条带，此条带不影响检测结果。
如果待测样本对PCR产生抑制，则内控对照条带变弱（和阴性对照相比），此时应先进行DNA抽提（推荐使用：Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原体DNA抽提试剂盒），然后再检测。
储存条件
2~8℃至少12个月。复溶后必须在-18℃保存。
效期
1年6个月
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文献和实验时样本之间干扰。 Q：说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ，细胞量多的话对检测结果有没有影响？ A：建议细胞量最多不要超过 106个，过量的细胞相当于染料被稀释，影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了，通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q：是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer？ A：不行，Binding Buffer 是必须要加的，Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+，Binding
化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位：酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下，在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育，酶促反应开始进行，经过一定时间后，用终止液终止反应，通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量，除以时间即可
针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律，但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图，如下所示： 延迟区：无规律可寻。 等速区：对应的是速率法，一般应用于酶活力的检测。 过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。 平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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