支原体污染PCR检测试剂盒

支原体污染PCR检测试剂盒

 PCR Detection Kit for Mycoplasma Contamination

货号：Myco-P-20，    规格：20次反应

货号：Myco-P-50，     规格：50次反应

货号：Myco-P-100，   规格：100次反应

 保存条件：保存于-20℃，避免反复冻融。没有反复冻融的情况下，保质期一年。

支原体污染PCR检测试剂盒采用支原体通用性引物，针对高度保守的支原体16S rRNA序列设计，适用于检测非常广泛的支原体种类，可检测造成细胞污染的所有支原体种类，不受真核细胞或细菌DNA干扰，最低检测极限（LOD，100%检出时的最低模板浓度）为反应液中10个支原体基因组，能在2到3小时内获得可靠的结果，是一种灵敏度高、特异性强、快速的检测支原体污染的方法。本试剂盒包含PCR反应所需的所有成分，用户只需准备好含DNA的样品即可。检测时只需进行一次PCR反应，降低了交叉污染的几率，使用方便。阳性对照与支原体使用相同引物，但设计成产物大小不同，可帮助排除假阴性，以及排除操作过程中阳性对照造成的串联污染。本试剂盒可用于血清、细胞上清、组织样本等多种类型的样本检测。

 背景介绍：

支原体（Mycoplasma spp.）是一类缺乏细胞壁的原核微生物，体积微小（约0.2-0.3 μm），在常规光学显微镜下不可见。它们形态多样，可呈球形、杆状或丝状，广泛存在于自然界中，包括土壤、水源、动植物体内，甚至人类呼吸道和生殖道黏膜表面。由于支原体能够透过除菌滤膜（孔径0.22 μm），长期潜伏于细胞培养体系内，且对常规抗生素（如青霉素）不敏感，因此极易在细胞培养、实验动物模型及生物制品生产过程中造成隐性污染，可导致细胞形态改变、代谢异常甚至实验结果失真。支原体污染已成为细胞培养过程中最常见且难以彻底清除的微生物污染源之一，据统计，全球约30%-70%的细胞培养实验室存在支原体污染问题，严重威胁科研数据的可靠性及生物医药产品的安全性。随着生物制药、细胞治疗、疫苗研发等领域的快速发展，细胞培养作为基础研究和工业生产的核心环节，其质量控制的重要性日益凸显，因此对支原体污染进行常规检测具有重要意义。

传统的支原体检测主要采用培养法，耗时长（需数周至数月），灵敏度低，无法检测低水平污染。基于聚合酶链式反应（PCR）的支原体检测试剂盒通过靶向支原体保守基因（如16S rRNA、ORF1等），实现了高灵敏度（可检测1-10 copies/μL核酸）与高特异性（区分不同支原体种属）。

目前已知的支原体种类约200种，污染细胞培养物的支原体种类有20多种。其中95%的污染是由五种支原体引起：精氨酸支原体（Mycoplasma arginini），发酵支原体（Mycoplasma fermentans），猪鼻支原体（Mycoplasma hyorhinis），口腔支原体（Mycoplasma orale）和莱氏无胆甾原体（Acholeplasma laidlawii）。原代细胞的支原体污染占比不到1%，但是种类最多，主要为鼠、禽和犬来源的支原体，如鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum）、关节炎支原体（Mycoplasma arthritidis）、肺支原体（Mycoplasma pulmonis）、犬支原体（Mycoplasma canis）等，一般是从原始的动物组织中带入进来，因此种类比较多，并且有不确定性。由上述内容可知，引起细胞污染的支原体种类较为繁杂，并且可能存在未知种类，因此使用支原体通用性PCR引物更适合检测支原体污染的需要，可以避免使用物种特异性引物可能导致的漏检情况。

相较于巢式PCR检测支原体污染，本产品操作更为简便，只需要进行一次PCR扩增。巢式PCR需要运行两次PCR扩增，以第一次扩增的产物作为底物进行第二次扩增，这一过程不仅增加了操作时间，而且由于第一次扩增的产物中DNA浓度较高，容易在取样时形成气溶胶，造成样品之间的串联污染。因为容易产生串联污染，巢式PCR技术目前正趋于淘汰。

本产品仅供科学研究使用。

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