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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
43
- 英文名:
Antigen Retrieval Buffer (50×TrisEDTA, pH 9.0)
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
常温
- 规格:
100ml
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
中文名称:TisEDTA抗原修复液(50×)
英文名称:Antigen Retrieval Buffer (50×Tris-EDTA, pH 9.0)
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
免疫染色实验,细胞或组织往往需要经甲醛、甲醛或其他醛类固定来维持本身的形态结构,然而此步操作通常会封闭抗原决定簇,使得相当多的抗原不能与抗体很好的进行反应,从而引起染色信号衰减,甚至出现假阴性现象。引起抗原决定簇被掩盖的原因在于:1)醛类固定剂导致组织上的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛键,从而封闭抗原表位;2)醛类固定剂在固定过程中与蛋白质发生交联(cross-link),形成醛交联蛋白,导致抗原表位被封闭。因此,需要对固定组织进行抗原修复(antigen retrieval,AR)来逆转被掩盖的抗原表位,使其重新暴露出来,恢复抗原表位-抗体的结合能力,从而改善染色效果。
抗原修复的方法非常多,主要有热诱导的抗原修复(Heat Induced Epitope Retrieval,HIER)和酶诱导的抗原修复(Proteolytic Induced Epitope Retrieval),修复方法的选择需要考虑到抗原表达程度、抗体要求、组织类型以及组织固定方法等因素。作为免疫染色至关重要的一步,抗原修复方法的选择、温度、pH值、修复时间、修复介质都会影响到实验结果。实验者需根据自身的实验体系以及实验条件来选择恰当的修复溶液,从而达到最佳的修复效果。
本品为Tris-EDTA抗原修复液,pH 9.0,适合用于经甲醛固定的石蜡切片的抗原修复。本品为50×的浓缩液,使用前需用ddH2O稀释成1×工作液。
储存条件:常温。
注意事项:
TisEDTA抗原修复液(50×) 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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