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Puromycin 嘌呤霉素盐酸盐

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  • ¥318 - 11485
  • 翌圣生物(Yeasen)已认证
  • 60210ES
  • 上海
  • 2026年01月14日
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    • 技术资料
    • CAS号

      58-58-2

    • 保存条件

      -20℃保存

    • 保质期

      有效期2年

    • 英文名

      Puromycin Dihydrochloride

    • 供应商

      翌圣生物科技(上海)股份有限公司

    • 库存

      大量

    • 规格

      25mg/100 mg/250 mg/500 mg/1 g

    规格:25mg产品价格:¥318.0
    规格:100 mg产品价格:¥1288.0
    规格:250 mg产品价格:¥2708.0
    规格:500 mg产品价格:¥4688.0
    规格:1 g产品价格:¥11485.0
    产品介绍

           嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑链霉菌(Streptomycesalboniger)发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素,通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌,各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。作用机制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3´末端的类似物,能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后,不会参与随后的任何反应,从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。

           嘌呤霉素产生菌Streptomycesalboniger内发现的pac基因编码嘌呤霉素N-乙酰转移酶(PAC),赋予机体对嘌呤霉素产生抗性。这一特性如今普遍应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。

           嘌呤霉素在细胞稳转株筛选中的普遍应用与慢病毒载体的特性有关,现在商业化的慢病毒载体多数都携带pac基因。在某些特定情况下,嘌呤霉素亦可以用来筛选转化携带pac基因质粒的大肠杆菌菌株。

     

    产品性质
     
     
    CAS 号(CAS NO.)
    58-58-2
    英文别名(English Synonym)
    Puromycin
    中文名称(Chinese Name)
    嘌呤霉素
    分子量(Molecular Weight)
    544.43 g/mol
    外观(Appearance)
    白色至米白色粉末
    纯度(Purity)
    ≥98%
     
    产品特色

    本产品在常温下稳定,避免高温和酸碱环境。对多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌有效,特别是对链球菌、肺炎球菌等有强效。对哺乳动物细胞也有一定毒性。

    研究应用:

    1. 作为抗生素筛选工具,用于研究细菌耐药性。
    2. 用于细胞培养中防止细菌污染。

    使用说明

    1. 建议使用浓度

    哺乳动物细胞:1-10 μg/mL,最佳浓度需要杀灭曲线来确定。

    大肠杆菌:LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌,使用浓度为125 μg/mL。

    【注】:使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节,而且受宿主细胞本身的影响。

    2.溶解方法

    用蒸馏水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/mL的母液,经0.22 μm滤膜过滤除菌后分装于-25~-15℃冻存;也可溶于甲醇,配制成10 mg/mL的储存液。

    3. 嘌呤霉素杀灭曲线的确定(以shRNA转染或者慢病毒转导为例)

    嘌呤霉素有效筛选浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢情况及细胞所处细胞周期位置等有关。为了筛选到稳定表达的shRNA细胞株,确定杀死未转染/转导细胞的最低浓度嘌呤霉素至关重要。建议初次做实验的客户一定要建立适合自身实验体系的杀死曲线(kill curve)。

    1)Day 1:24孔板内以5~8×104 cells/孔的密度铺板,铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。37℃细胞孵育过夜。

    2)Day 2:①准备筛选培养基:含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基(如0-15 μg/mL,至少5个梯度);②往孵育过夜后的细胞内更换新鲜配制的筛选培养基;之后37℃孵育细胞。

    3)Day 4:更换新鲜的筛选培养基,并观察细胞存活率。

    4)根据细胞的生长状态,约2-3天更换新鲜的筛选培养基。

    5)每日监测细胞,观察存活细胞率,从而确定抗生素筛选开始4-6天内有效杀死非转染或所有非转导细胞的药物最低浓度。

    4. 哺乳动物稳定转染细胞株的筛选

    等转染含有pac基因的质粒后,细胞在含有嘌呤霉素的培养基中增殖,以筛选出稳定转染子。

    1)细胞转染48 h后,将细胞(原样或稀释)置于含有适当浓度嘌呤霉素的新鲜培养基中培养。

    【注】:当细胞处于分裂活跃期时,抗生素作用最明显。细胞过于密集,抗生素产生的效力会明显下降。最好进行细胞分盘使其密度不超过25%。

    2)每隔2-3天,移除和更换含有嘌呤霉素的培养基。

    3)筛选7天后评估细胞形成的病灶。病灶可能需要额外的一周或者更多时间,这依赖于宿主细胞系和转染筛选效率。

    【注】:每日进行细胞生长状态的观察。嘌呤霉素的筛选至少需要48 h,有效浓度嘌呤霉素的筛选周期一般在3-10天。

    4)转移和放置5-10个抗性克隆到一个35 mm的培养皿中,用选择培养基继续培养7天。此次富集培养是为日后的细胞毒性实验做准备。

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    该产品被引用文献

    [1] Meng F, Yu Z, Zhang D, et al. Induced phase separation of mutant NF2 imprisons the cGAS-STING machinery to abrogate antitumor immunity. Mol Cell. 2021;81(20):4147-4164.e7. doi:10.1016/j.molcel.2021.07.040(IF:17.970)
    [2] Chen S, Liu S, Wang J, et al. TBK1-Mediated DRP1 Targeting Confers Nucleic Acid Sensing to Reprogram Mitochondrial Dynamics and Physiology. Mol Cell. 2020;80(5):810-827.e7. doi:10.1016/j.molcel.2020.10.018(IF:15.584)
    [3] Zhao Q, Zheng K, Ma C, et al. PTPS Facilitates Compartmentalized LTBP1 S-Nitrosylation and Promotes Tumor Growth under Hypoxia. Mol Cell. 2020;77(1):95-107.e5. doi:10.1016/j.molcel.2019.09.018(IF:14.548)
    [4] Mo J, Liu F, Sun X, et al. Inhibition of the FACT Complex Targets Aberrant Hedgehog Signaling and Overcomes Resistance to Smoothened Antagonists. Cancer Res. 2021;81(11):3105-3120. doi:10.1158/0008-5472.CAN-20-3186(IF:12.701)
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    • 【求助】反复搜寻puromycin resistance protein的分子量大小,仍未果

      天心令 本虾米急需知道puromycin resistance protein (puroR)的KDa量是多少 在google上,pubmed上,搜了好些天,都没有搜到 请高手们指点指点 在pubmed的protein上搜索,它有氨基酸数目的显示,但没有分子量的显示。 谢谢各位先 woxingwosu 最好把你的搜索到结果的网页发出来,或者是pubmed的地址,这样才好给你分析。

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