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- 李记生物Life-iLab
- AB11L241
- 上海
- 2026年04月08日
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- 英文名：
Puromycin Dihydrochloride
- CAS号：
/
- 保质期：
24个月
- 供应商：
李记生物
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
25mg
嘌呤霉素 (Puromycin Dihydrochloride)
产品描述Puromycin是来源于Streptomyces alboniger的一种氨基核苷类抗生素，中文名为嘌呤霉素，常用于筛选通过质粒转染/转化、病毒感染等方法能表达pac基因(puror)的真核或原核多克隆或单克隆细胞。Puromycin不仅用于稳定细胞株的筛选，也用于稳定细胞株的维持。本产品的10mg/ml包装经过滤除菌，可以直接用于细胞培养。
Puromycin的特点是快速作用于细胞，一般2 d内可以杀死99%的不表达pac基因的细胞。
在革兰氏阳性菌、动物或昆虫细胞中，嘌呤霉素通过抑制蛋白质合成而抑制或杀死细胞。其作用机制为嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3'末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素与A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。
Pac基因表达嘌呤霉素N-乙酰转移酶(Puromycin N-acetyl-tranferase)，该基因是在Streptomyces alboniger中发现的。如果表达基因，就会对嘌呤霉素产生抗性，这一特性目前普遍应用于筛选表达pac基因的哺乳动物稳定细胞株等。例如，很多商业化的慢病毒载体都携带pac基因(一般在质粒图谱上标记为puror)，从而利用嘌呤霉素筛选特定基因的稳定表达细胞株。嘌呤霉素也可以用来筛选表达pac基因的大肠杆菌菌株、酵母菌株等。
订购信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
| 嘌呤霉素 (Puromycin Dihydrochloride) | AB11L241 | 25 mg |
蓝冰运输。-20℃保存，有效期24个月。
技术参数
1.CAS：58-58-2
2.分子式：C22H29N7O5•2HCl
3.分子量：544.43
4.纯度：>98%
5.结构式：
使用方法
1.推荐工作浓度：
推荐的作用于哺乳动物细胞的嘌呤霉素浓度一般为1-10μg/ml，但最佳工作浓度需要通过剂量反应曲线来确定
表1. 部分常见哺乳动物细胞的推荐工作浓度表
| 细胞名称 | 细胞类型 | 嘌呤霉素浓度 |
| A549 | Lung cancer | 1-2μg/ml |
| B16 | Mouse melanocytes | 1-2μg/ml |
| ES cell | Human embryonic stem cells | 0.5-5μg/ml |
| H1299 | Non-small cell lung carcinoma | 1-3μg/ml |
| HEK293 | Human embryonic kidney | 0.5-3μg/ml |
| HeLa | Human cervical cancer | 1-2μg/ml |
| HepG2 | Human hepatocellular carcinoma | 0.5-2μg/ml |
| HT1080 | Human fibrosarcoma | 0.5-2μg/ml |
| MCF-7 | Human breast cancer | 0.5-2μg/ml |
| MDA-MB-231 | Human breast cancer | 0.5-5μg/ml |
| MEF | Mouse fibroblasts | 1-5μg/ml |
嘌呤霉素的有效筛选浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢及细胞所处细胞周期等因素相关。为了筛选到稳定表达的shRNA或感染病毒的细胞株，确定杀死未转染/感染细胞的最低浓度嘌呤霉素非常重要。对于初次使用的细胞，一般需要通过实验来确定适合自身实验体系的剂量反应曲线(dose-response curve or kill curve)。
（1）第一天：24孔板中以5~8×104cells/孔的密度接种细胞，接种够量的孔以便进行后续的剂量梯度实验。细胞培养箱内培养过夜。
（2）第二天：在培养过夜后的细胞中更换新鲜配制的筛选培养基，该筛选培养基为含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基(如0、1、2.5、5、7.5、10μg/ml等)，更换培养基后在细胞培养箱中继续培养。
（3）第三天后：由于嘌呤霉素可以快速作用于细胞，一般2 d内可以杀死99%的未表达pac基因的细胞，所以在加嘌呤霉素后的1-2 d就可以进行观察细胞存活率，从而确定有效杀死正常细胞的药物最低浓度。如果细胞耐药性比较强，需要每日观察，一般4-10 d内即可确定嘌呤霉素的最低浓度。
3. 哺乳动物稳定表达细胞株的筛选
转染含有pac基因的质粒或者感染含有该基因的病毒后，即可筛选稳定表达株。
（1）细胞转染或感染48 h后，将细胞置于含有适当浓度嘌呤霉素的新鲜培养基中培养，此为处理组。
【注】：当细胞处于分裂活跃期时，抗生素作用最明显。细胞过于密集，抗生素产生的效力会明显下降，所以细胞的密度最好不超过25%。建议同时做一个正常细胞的对照组。转染或感染48 h后，如果细胞过密也可以消化后重新接种细胞，培养过夜后即可进行嘌呤霉素筛选。
（2）每隔2-3 d，更换含有嘌呤霉素的培养基。
（3）筛选7 d后，对照组正常细胞应该100%死亡，处理组中存活的细胞为表达pac基因的细胞。然后根据实验目的进行多克隆或单克隆细胞的筛选。
【注】：每日进行细胞生长状态的观察。嘌呤霉素的筛选至少需要24 h，有效浓度嘌呤霉素的筛选周期一般在2-10 d。
（4）待细胞可以稳定生长后，嘌呤霉素的浓度可以减半用于后续的培养。在得到稳定表达细胞株后，一般建议嘌呤霉素也须持续加入，并2-3 d更换含有嘌呤霉素的新鲜培养液。
注意事项
1.本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。
2.用于细胞实验，溶解后，须用一次性针头滤器过滤除菌。
3.抗生素不稳定，请在有效期内尽快使用。
4.以上数据均来自公开文献，李记生物暂未本产品进行独立验证，仅供参考。
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文献和实验相关实验
由白黑链霉菌（ Streptomyces alboniger）的培养滤液中获得的抗菌素，除对所有细菌具抗性外，还具有抗肿瘤活性。由于其结构与 tRNA的末端结构类似，故能抑制细菌及真核细胞的蛋白质合成。常作为实验用药。它作用于结合在核糖核蛋白体上相应部位的肽酰 tRNA，可使肽酰嘌呤霉素从核糖核蛋白体上游离出来。
嘌呤霉素是一种蛋白质合成抑制剂,它具有与tRNA分子末端类似的结构, 能够同氨基酸结合，代替氨酰化的tRNA同核糖体的A位点结合，并掺入到生长的肽链中。虽然嘌呤霉素能够同A位点结合,但是不能参与随后的任何反应, 因而导致蛋白质合成的终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟的多肽。
【求助】反复搜寻puromycin resistance protein的分子量大小，仍未果
天心令 本虾米急需知道puromycin resistance protein （puroR）的KDa量是多少 在google上，pubmed上，搜了好些天，都没有搜到 请高手们指点指点 在pubmed的protein上搜索，它有氨基酸数目的显示，但没有分子量的显示。 谢谢各位先 woxingwosu 最好把你的搜索到结果的网页发出来，或者是pubmed的地址，这样才好给你分析。
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