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- 2025年11月23日
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Hoechst 33342，也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为C27H28N6O·3HCl·3H2O，分子量为615.99，CAS Number 23491-52-3。
Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。
Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
Hoechst 33342的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33342和双链DNA结合后，最大激发波长为350nm，最大发射波长为461nm。
本Hoechst 33342染色液可用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
| 试剂盒组成 | 规格 | 保存条件 |
| Hoechst 33342浓缩液（50X） | 1ml | -20℃避光 |
| Hoechst 33342稀释液 | 50ml | 2-8℃ |
使用说明：
Hoechst 33342染色液染色液的配制：将Hoechst 33342浓缩液取出解冻，轻轻混匀，短时间离心，根据使用量，按照1ml33342稀释液加入20ul33342浓缩液的比例配制，即成Hoechst 33342染色液。此配好的染色液深度为10ug/ml,如果感觉染色颜色比较深，可适当的稀释（用稀释液）。此配好的染色液未用完可存放于-20℃避光。
1. 对于固定的细胞或组织：
a. 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33342染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33342染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33342染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。
c. 吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或组织：
a. 加入适当量Hoechst 33342染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。
| 红细胞裂解液 | NobleRyder | 100ml/500ml | 60.00/200.00 |
| Hoechst 33258染色液 | NobleRyder | 50ml | 298.00 |
| Hoechst 33342染色液 | NobleRyder | 50ml | 298.00 |
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文献和实验Isolation of Resident Cardiac Progenitor Cells by Hoechst 33342 Staining
of stem cells to efficiently efflux vital dyes such as Hoechst 33342. During fluoresence activated cell sorting (FACS) such Hoechst-extruding cells appear to the side of Hoechst-dye retaining cells and have thus been termed side population (SP) cells
1．悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342，终浓度为1μg/ml；帖壁生长的细胞用含有0.02％EDTA的0.25％胰蛋白酶消化成单细胞悬液，离心，弃上清，用1ml全培养液重悬细胞，加入Heochst 33342，终浓度为1μg/ml，37℃孵育7～10min。 2．4℃ 500～1000r/min离心弃去染液。 3．加入1.0ml PI染液，4℃避光染色15min。 4．400目的筛网过滤1次。 5．流式细胞仪分析。
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