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Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay
美国ScienCell研究实验室(www.sciencellonline.com)成立于1999年,公司总部位于美国加州的圣地亚哥。主要致力于实验室科研用原代细胞、原代细胞专用培养基、原代细胞无血清培养基、干细胞、干细胞培养基、干细胞无血清培养基的研究和开发,在全球拥有众多客户。在国内销售15年来,很多老师应用其产品发表了高质量的SCI文章,且有着极高的文献引用率。凭借着严格的质控和优秀的产品品质,深受广大科研工作者的信赖。
ScienCell研究实验室生产的原代细胞、原代细胞专用培养基都经过了严格的质量控制,细胞纯度可达98%。其中包括21种人体正常细胞系统,90多种不同细胞类型。大多数细胞在全球唯有ScienCell实验室能够成功分离,产品质量过硬。确保了实验结果的重复性和连贯性。
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Description
The ScienCell Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay is used for detection of apoptosis (programmed cell death) in individual cells based on the terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-mediated dUTP-biotin nick-end-labeling (TUNEL) technology. In brief, the 3'-OH end of the DNA strand breaks in apoptotic cells is labeled with biotinylated nucleotides using the enzyme TdT. Streptavidin conjugated horseradish peroxidase (HRP) is then bound to the biotinylated nucleotides, and visualized using the peroxidase substrate, 3,3'-diaminobenzidine (DAB). The nuclei of apoptotic cells should be observed dark brown under light microscope.
Product Use
This assay kit is used to evaluate LDH activity in vitro. It is for research use only. Not for use in animals, humans, or diagnostic procedures.
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近几年的新药研发成功率在逐年下降,其根本原因之一就是传统的药物筛选系统是建立在只具有30-40%人类基因群的一系列细胞株上。这样一个有“缺陷型”药物筛选系统所产生的药物用于人体上就会出现许多致命的弱点和不完整性。新一代药物筛选系统是含有一系列近乎完整的人类基因群的原代细胞株。而利用这些原代细胞株所甄别和筛选出来的候选药物,其诊治人类疾病的成功几率将大大增加。这样不但大大节省了新药的开发成本,而且将极大地提高人类的健康质量。这些产品从根本上提高了全球生命医学研究、人类重要疾病药物研发、新药研发的成功率。所以上海中乔新舟生物科技有限公司致力于提供优质原代细胞产品和完善的售后服务。
美国ScienCell研究实验室(www.sciencellonline.com)成立于1999年,公司总部位于美国加州的圣地亚哥。主要致力于实验室科研用原代细胞、原代细胞专用培养基、原代细胞无血清培养基、干细胞、干细胞培养基、干细胞无血清培养基的研究和开发,在全球拥有众多客户。在国内销售15年来,很多老师应用其产品发表了高质量的SCI文章,凭借着严格的质控和优秀的产品品质,深受广大科研工作者的信赖。
ScienCell研究实验室生产的原代细胞、原代细胞专用培养基都经过了严格的质量控制,细胞纯度可达98%。其中包括21种人体正常细胞系统,90多种不同细胞类型。大多数细胞在全球唯有ScienCell实验室能够成功分离,产品质量过硬。 确保了实验结果的真实性、重复性和连贯性。
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中乔新舟的PI团队已经发展到专职PI 20人,联席PI 312人,其中大多数拥有海外背景。截止到2009年3月,以PI或联席PI为第一作者发表SCI 论文1682 篇(总IF 值为5721.82,其中影响因子IF>5.0 的论文216 篇,IF>10.0论文32 篇)。
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文献和实验,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法一般称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)。 由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。低分子量的DNA分离后,也可使用DNA聚合酶进行缺口翻译(nick translation),使低分子量的DNA标记或染色,然后分析凋亡细胞。 TUNEL或缺口翻译法实际上是分子生物学与形态学相结合的研究方法,对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,能准确的反应细胞凋亡最典型的生物化学和形态
材料与试剂 1. TUNEL试剂盒: ①从瓶2中取出标记液100μl分别作为两个阴性对照。 ②将瓶1的全部溶液50μl加入瓶2剩余的450μl标记液中,使其成为500μl的TUNEL混合物。 2. POD转换液(一旦溶解,储存于4℃,不得再冻存) 3. 漂洗液:PBS 4. 固定液:4%多聚甲醛(用pH7.4的PBS配)。 5. 封闭液:0.3%H2O2 (用甲醛配)。 6. DBA:金属增强底物剂。 7. 细胞透化液:0.1%Trition X
的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应










