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上海一研
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20T|50T|100T
中文名称：TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC标记POD法,通用)
英文名称：
产品规格：20T|50T|100T
发货周期：1～3天
TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒（FITC 标记/POD 法）是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA 的断裂情况，其原理是生物素（biotin）标记的dUTP 在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA 的3’-OH 末端，再以streptavidin-FITC 与生物素结合，使结果可用荧光显微镜检测；荧光素亦可被偶联过氧化物酶Peroxidase（POD）的抗荧光素抗体(POD-conjugated Anti-FITC)标记,在POD 底物二氨基联（DAB）的存在下，产生很强的颜色反应（呈棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在普通光学显微镜下即可观察和计数凋亡细胞。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA 的断裂，因而没有3’-OH 形成，很少能够被标记或染色。
注意事项
1. 各个样本请用免疫组化笔做好标记，另外加2 张样本切片分别用于阳性片和阴性片制备并做好标记。
2. 在每步反应或浸洗的间隙时，配制下一步即用的工作液。
3. 反应液最好根椐计算好的样本数量集中配制，再分别滴加于各样本上，避免因每个样本单独配制而产生的试剂损耗，TdT 酶反应液如需短暂保存时，请置于冰上。
4. 配制好的DAB 工作液应为浅棕色，如颜色过深，请勿使用。
5. 操作请戴手套，防止试剂沾染皮肤，如有沾染请立即用大量清水冲洗。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC标记POD法,通用)使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
2号染色体开放阅读框49抗体英文全称Cytochrome P45026B1英文简称CYP26B1检测范围1480nmol/L-80U/L
2号染色体开放阅读框50抗体英文全称Free Immunoglobulin E英文简称FIgE检测范围1481nmol/L-160μg/mL
科凯恩氏综合症相关蛋白/早衰蛋白CSA抗体英文全称STA-IgG英文简称STA-IgG检测范围1482nmol/L-80ng/mL
7号染色体开放阅读框65抗体英文全称Gliadorphin Alpha英文简称Gliadin43-49检测范围1483nmol/L-200ng/mL
磷酸化丝切蛋白抗体英文全称Salivary alpha1-amyla英文简称AMY1检测范围1484nmol/L-400U/mL
CD5抗体英文全称zona pellucida antibody英文简称ZP-Ab检测范围1485nmol/L-
半胱酸蛋白酶蛋白14抗体英文全称HCG antibody英文简称HCG-Ab检测范围1486nmol/L-
3号染色体开放阅读框14抗体英文全称nicotinamide adenine dinucleotide英文简称NAD检测范围1487nmol/L-8ng/mL
3号染色体开放阅读框20抗体英文全称IgD5英文简称IgD5检测范围1488nmol/L-8ng/mL
3号染色体开放阅读框23抗体英文全称11β Hydroxysteroid dehydrogenase 1英文简称11βHSD1检测范围1489nmol/L-2000pg/mL
3号染色体开放阅读框31抗体英文全称sphingosine 1-phosphate receptor type 1英文简称S1P1检测范围1490nmol/L-1600pg/mL
3号染色体开放阅读框32抗体英文全称NT-proUcn2英文简称NT-proUcn2检测范围1491nmol/L-80pg/mL
3号染色体开放阅读框36抗体英文全称英文简称检测范围1492nmol/L-32ng/mL
3号染色体开放阅读框38抗体英文全称epidemic hemorrhagic disease IgM antibody英文简称EHDIgM检测范围1493nmol/L-
3号染色体开放阅读框55抗体英文全称A Streptococcal Polysaccharide Antigens英文简称ASPAg检测范围1494nmol/L-2000pg/mL
磷酸化酪氨酸 单克隆抗体Phosphotyrosine Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
肿瘤坏死因子α 单克隆抗体TNF α Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
肿瘤坏死因子α 单克隆抗体TNF α Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
P53 (Mono Methyl Lys370) 单克隆抗体P53 (Mono Methyl Lys370) Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
信号转导因子和转录激活因子3 单克隆抗体STAT3 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
磷脂酰肌醇3激酶P85α 单克隆抗体PI3 Kinase P85α Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC标记POD法,通用)Herba lysimachiae金钱草染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 B淋巴细胞新型蛋白1抗体别 名 B cell novel protein 1; B cell novel protein; B-cell novel protein 1; BCNP1; FAM129C; Family with sequence similarity 129, member C; Niban-like protein 2; NIBL2_HUMAN; Protein FAM129C.研究领域 细胞生物 免疫学 淋巴细胞 b-淋巴细胞蛋白分子量 predicted molecular weight: 77kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from huamn BCNP
Radix euphorbiae pekinensis京大戟染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 脑表达X连锁蛋白4抗体别 名 BEXL1; NADE3; BEX1 like 1; brain expressed gene 4; Brain expressed X linked protein 4 homolog; Nerve growth factor receptor associated protein 3; Protein BEX4; TCEAL7; transcription elongation factor A (SII) like 7; BEX4_HUMAN .研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 14kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BEX4
Herba schizonepetae荆芥染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 乳腺癌相关蛋白1抗体别 名 BIN2; BIN2_HUMAN; BRAP 1; Breast cancer associated protein BRAP1; Breast cancer-associated protein 1; Bridging integrator 2.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学蛋白分子量 predicted molecular weight: 62kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BIN2/BRAP1
Semen allii tuberosi韭菜子染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 巴德-毕德氏综合征蛋白BBS5抗体别 名 Bardet Biedl syndrome 5 protein; BBS 5; BBS-5.研究领域 肿瘤 细胞生物 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 38kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BBS5
Flos chrysanthemi菊花染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 脑蛋白CG6抗体别 名 Brain protein CG 6; Brain protein CG-6; Brain protein CG6; C9orf4; CG 6; CG6; chromosome 9 open reading frame 4; CI004_HUMAN; Uncharacterized protein C9orf4.研究领域 细胞生物 发育生物学 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 37kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Brain protein CG6
英文名称：
产品规格：20T|50T|100T
发货周期：1～3天
TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒（FITC 标记/POD 法）是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA 的断裂情况，其原理是生物素（biotin）标记的dUTP 在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA 的3’-OH 末端，再以streptavidin-FITC 与生物素结合，使结果可用荧光显微镜检测；荧光素亦可被偶联过氧化物酶Peroxidase（POD）的抗荧光素抗体(POD-conjugated Anti-FITC)标记,在POD 底物二氨基联（DAB）的存在下，产生很强的颜色反应（呈棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在普通光学显微镜下即可观察和计数凋亡细胞。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA 的断裂，因而没有3’-OH 形成，很少能够被标记或染色。
注意事项
1. 各个样本请用免疫组化笔做好标记，另外加2 张样本切片分别用于阳性片和阴性片制备并做好标记。
2. 在每步反应或浸洗的间隙时，配制下一步即用的工作液。
3. 反应液最好根椐计算好的样本数量集中配制，再分别滴加于各样本上，避免因每个样本单独配制而产生的试剂损耗，TdT 酶反应液如需短暂保存时，请置于冰上。
4. 配制好的DAB 工作液应为浅棕色，如颜色过深，请勿使用。
5. 操作请戴手套，防止试剂沾染皮肤，如有沾染请立即用大量清水冲洗。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC标记POD法,通用)使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
2号染色体开放阅读框49抗体英文全称Cytochrome P45026B1英文简称CYP26B1检测范围1480nmol/L-80U/L
2号染色体开放阅读框50抗体英文全称Free Immunoglobulin E英文简称FIgE检测范围1481nmol/L-160μg/mL
科凯恩氏综合症相关蛋白/早衰蛋白CSA抗体英文全称STA-IgG英文简称STA-IgG检测范围1482nmol/L-80ng/mL
7号染色体开放阅读框65抗体英文全称Gliadorphin Alpha英文简称Gliadin43-49检测范围1483nmol/L-200ng/mL
磷酸化丝切蛋白抗体英文全称Salivary alpha1-amyla英文简称AMY1检测范围1484nmol/L-400U/mL
CD5抗体英文全称zona pellucida antibody英文简称ZP-Ab检测范围1485nmol/L-
半胱酸蛋白酶蛋白14抗体英文全称HCG antibody英文简称HCG-Ab检测范围1486nmol/L-
3号染色体开放阅读框14抗体英文全称nicotinamide adenine dinucleotide英文简称NAD检测范围1487nmol/L-8ng/mL
3号染色体开放阅读框20抗体英文全称IgD5英文简称IgD5检测范围1488nmol/L-8ng/mL
3号染色体开放阅读框23抗体英文全称11β Hydroxysteroid dehydrogenase 1英文简称11βHSD1检测范围1489nmol/L-2000pg/mL
3号染色体开放阅读框31抗体英文全称sphingosine 1-phosphate receptor type 1英文简称S1P1检测范围1490nmol/L-1600pg/mL
3号染色体开放阅读框32抗体英文全称NT-proUcn2英文简称NT-proUcn2检测范围1491nmol/L-80pg/mL
3号染色体开放阅读框36抗体英文全称英文简称检测范围1492nmol/L-32ng/mL
3号染色体开放阅读框38抗体英文全称epidemic hemorrhagic disease IgM antibody英文简称EHDIgM检测范围1493nmol/L-
3号染色体开放阅读框55抗体英文全称A Streptococcal Polysaccharide Antigens英文简称ASPAg检测范围1494nmol/L-2000pg/mL
磷酸化酪氨酸 单克隆抗体Phosphotyrosine Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
肿瘤坏死因子α 单克隆抗体TNF α Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
肿瘤坏死因子α 单克隆抗体TNF α Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
P53 (Mono Methyl Lys370) 单克隆抗体P53 (Mono Methyl Lys370) Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
信号转导因子和转录激活因子3 单克隆抗体STAT3 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
磷脂酰肌醇3激酶P85α 单克隆抗体PI3 Kinase P85α Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC标记POD法,通用)Herba lysimachiae金钱草染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 B淋巴细胞新型蛋白1抗体别 名 B cell novel protein 1; B cell novel protein; B-cell novel protein 1; BCNP1; FAM129C; Family with sequence similarity 129, member C; Niban-like protein 2; NIBL2_HUMAN; Protein FAM129C.研究领域 细胞生物 免疫学 淋巴细胞 b-淋巴细胞蛋白分子量 predicted molecular weight: 77kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from huamn BCNP
Radix euphorbiae pekinensis京大戟染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 脑表达X连锁蛋白4抗体别 名 BEXL1; NADE3; BEX1 like 1; brain expressed gene 4; Brain expressed X linked protein 4 homolog; Nerve growth factor receptor associated protein 3; Protein BEX4; TCEAL7; transcription elongation factor A (SII) like 7; BEX4_HUMAN .研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 14kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BEX4
Herba schizonepetae荆芥染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 乳腺癌相关蛋白1抗体别 名 BIN2; BIN2_HUMAN; BRAP 1; Breast cancer associated protein BRAP1; Breast cancer-associated protein 1; Bridging integrator 2.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学蛋白分子量 predicted molecular weight: 62kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BIN2/BRAP1
Semen allii tuberosi韭菜子染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 巴德-毕德氏综合征蛋白BBS5抗体别 名 Bardet Biedl syndrome 5 protein; BBS 5; BBS-5.研究领域 肿瘤 细胞生物 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 38kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BBS5
Flos chrysanthemi菊花染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 脑蛋白CG6抗体别 名 Brain protein CG 6; Brain protein CG-6; Brain protein CG6; C9orf4; CG 6; CG6; chromosome 9 open reading frame 4; CI004_HUMAN; Uncharacterized protein C9orf4.研究领域 细胞生物 发育生物学 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 37kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Brain protein CG6
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文献和实验相关实验
的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。由此，TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型，绿色荧光)为例) TUNEL检测：使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min，再使用二甲苯脱蜡2次，每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗，便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
用了许多方法检测小鼠的肝脏、脑部、睾丸等组织的细胞凋亡，其中 TUNEL 法做的最多，我购买的试剂盒主要是 roche、 promega 公司，结果大多数成功，偶尔也有失败，下面我把实验中的关键问题与大家共享一下，同时也希望能对初学者有所帮忙。 TUNEL 法的实验原理 基本原理：对不同组织切片先增加细胞膜通透性，然后让 rTDT 和生物标记的 dTUTP 进入细胞内，在 rTDT 的辅助下 dTUTP 与核断裂的 DNA 3』-OH 结合，再用 HRP 标记的链霉
荧光素FITC标记抗体的方法（Marsshall法、Chadwick法、改良法、透析标记法）
Marsshall(1958)法标记荧光抗体，也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark等(1963)的透析标记法。 1 ． Marsshall 法 (1)材料抗体球蛋白溶液、0.5mol／L(pH9.0)碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1％硫柳汞水溶液、50mL小烧杯、4℃冰箱、电磁搅拌器、透析袋、玻棒、pH7.2或3.0的0.01mol／L PBS等。 (2)方法及步骤 ①抗体的准备 取适量已知
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