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博奥派克
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文献和实验适用于,无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者 对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶,Trypsin) 配方:100ml PBS,0.25g胰酶 步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2・12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水) 2 称胰酶0.25g 3 加入PBS中,低速搅拌 〈4h冰浴中,或者4℃过夜 低速搅拌0.5h冰浴中
胰酶 pancreatin 为从牛和猪的胰脏中提取的粗酶的总称,其中含有胰蛋白酶( Trypsin)、脂肪酶( lipase)、淀粉酶( amylase)、麦芽糖酶( maltase)和核酸酶( nuclease)等。
olivial 最近想用western blot检测小胶质细胞活化后细胞内p-Akt表达情况(包括时间点),那么提蛋白时可否用胰酶消化的方法?加药前是否要将完全培养液换成无血清培养液? ylhuang0502 Q1. 提蛋白时可否的方法? A1.: 不要用胰酶消化, 贴壁细胞处理后,立刻至于冰上,用PBS洗三次后,直接加lysis buffer裂解提蛋白,lysis buffer的组分可查查文献,或在本版搜一下。
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