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- 联迈生物
- LM1100M
- 中国/美国/欧洲
- 2025年07月13日
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大量
- 英文名：
TDT；Terminal Transferase；Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
- 保质期：
2年
- 供应商：
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件：
RT
- 规格：
瓶
| [产品编号] | LM1100M |
| [CAS号] | 9027-67-2 |
| [规格] | BR,20u/ul |
| [包装] | 500u/2500U |
| [到货期] | 2-3天 |
英文名称：TDT；Terminal Transferase；Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
其他名称：末端脱氧核苷酸转移酶；胸腺五肽
CAS号：9027-67-2
分子量：60000
级别：BR
来源：大肠杆菌细胞，含有编码牛胸腺末端脱氧核苷转移酶的基因
浓度：20u/ul
活性定义：是指在37℃、60分钟内将1nmol脱氧核糖核酸掺入多聚核苷酸片段（吸附在DE-81上）所需的酶量
酶活性分析混合物：66mM钾（PH7.2），1mM CoCL2, 0.01%(v/v) Triton X-100, 10uM oligo(dT)10, 1mM dTTP和0.4MBq/ml[3h]-dTTP
保存液组分：100mM 醋酸钾（PH6.8)、2mM β-巯基乙醇，0.01%(v/v) Triton X-100和50%(v/v)甘油
5×反应缓冲液：1M胂酸钾、125mM Tris，0.05%(v/v) Triton X-100，5mM CoCL2(PH7.2,25℃)
抑制剂：金属螯合剂、铵、氯化物、碘化物和磷酸盐离子
失活：加入EDTA，70℃加热10分钟
质量保证：测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
注意：由于含有CoCL2，TdT反应缓冲液不能与下游应用兼容，需采用柱离心法或苯酚/氯仿抽提及乙醇沉淀方法纯化反应混合物，除去CoCL2
性状(以下信息仅供参考)：悬浮液，重组酶。末端转移酶（Terminal transferase, TdT）是一种无需模板的DNA聚合酶，催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物。一般操作是：先在载体上打开一单个位点，把它与末端转移酶和某一dNTP（如dATP）一起保温以使添尾，另一待插入的外源DNA片段则用互补的用同法添dNTP（dTTP）用同法添尾。接着使上述两种都接上互补单链尾的DNA片段彼此退火，使形成一杂合载体来转化受体菌。杂合载体中的裂隙或切口可被受全菌所修复。
用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)催化DNA的3'末端添加同聚物；DNA的3'末端标记
保存：-20°C
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文献和实验c，用-20度预冷的丙酮冷冻固定10分钟 d，PBS清洗 10minX2 e，用新鲜配制的通透液(含0.1%的Triton X-100和0.1%的柠檬酸钠溶液) 室温通透15min。 f，PBS清洗 10minX2 g. 阳性对照组加入DNase I 40ul(1u/ul)，37度孵育15min h. PBS清洗 10minX2 i. Roehe试剂盒中的的TUNEL反应缓冲液(含FITC标记的dUTP)和脱氧核糖 核酸末端转移酶
细胞凋亡时主要的生化特征是其染色质发生浓缩， 染色质DNA在核小体单位之间的连接处断裂， 形成50~300kbp长的DNA大片段， 或180~200bp整数倍的寡核苷酸片段， 在凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱（DNA ladder）。细胞经处理后，采用常规方法分离提纯DNA,进行琼脂糖凝胶和溴化乙啶染色，在凋亡细胞群中可观察到典型的DNA ladder.如果细胞量很少，还可在分离提纯DNA后，用32P-ATP和脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）使DNA标记，然后进行电泳和放射自显影，观察凋亡
一、TUNEL法细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL).由于正常的或正在增殖的细胞几乎
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