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大量
- 英文名:
SP6 RNA Polymerase
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
瓶
| [产品编号] | LM1093M |
| [CAS号] | -- |
| [规格] | BR,20u/ul |
| [包装] | 2KU/5kU |
| [到货期] | 2-3天 |
英文名称:SP6 RNA Polymerase
其他名称:SP6核糖核酸聚合酶
级别:BR
分子量:单体约98kDa
来源:大肠杆菌细胞,含有编码相应RNA聚合酶的克隆基因
浓度:20u/ul(≥100U/ul,HC)
活力定义:是指在37℃、60分钟内将1nmol AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81)光吸收形式)所需的酶量
酶活性分析混合物:40mM Tris-HCL(PH8.0), 10mM DTT, 6mM MgCL2, 2mM 亚精胺,0.5mM 各种NTP, 0.6MBq/ML(3H).-ATP和20ug/ml含有相应启动子序列的质粒DNA
保存缓冲:每种聚合酶保存于50mM Tris-HCL(PH8.0), 5mM DTT, 0.1mg/ml BSA,150mM NaC1, 0.5mM ELUGENT去污剂和50%(V/V) 甘油
5×转录缓冲液:200mM Tris-HCL(PH9.0,25℃), 30mM MgCL2, 50mM DTT, 50mM NaC1和10mM 亚精胺
抑制剂:金属螯合剂,当NaC1或KC1浓度高于150mM(SP6和T7 RNA聚合酶)时,酶活性降低超过50%,硫酸铵可使酶活性降低超过50%
失活:加入EDTA或者70℃加热10分钟
质量控制:相关测试表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
功能测试:体外转录反应
特点:合成掺入特殊核苷酸,如氨基-、生物素-、荧光素-、标记的核苷酸
性状(以下信息仅供参考):液体,SP6核糖核酸聚合酶是一种依赖DNA的聚合酶,对SP6启动子序列表现高度专一性。用该酶合成RNA,仅能以SP6 DNA或克隆在SP6 启动下游的DNA作为合成模板。该酶能以32P,35S及3H标记的核苷三磷酸为底物
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)合成标记和未标记的RNA,用于杂交、体外RNA翻译;作为RNA、siRNA、RNase酶切保护分析的底物以及基因组DNA测序的模板;研究RNA的二级结构和RNA-蛋白质相互作用、RNA剪接;标记的RNA探针合成,用于印迹实验、原位杂交、microarray杂交
保存:-20℃
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文献和实验热稳定性聚合酶(1,2)产生PCR产物提供一个匹配碱基。如表1总结的,这些聚合酶常常以不依赖模板方式在扩增产物的3’端加上一个脱氧腺苷酸(3,4)。pGEM®-TEasy高拷贝数载体包含有T7和SP6RNA聚合酶启动子,其侧翼和多克隆位点区相接,多克隆位点区位于β半乳糖苷酶的α肽编码区内。α肽插入失活允许在指示培养基用颜色直接筛选重组克隆。另外这两个载体的多克隆位点区的限制性酶切位点适用于采用Promega公司Erase-a-Base®系统(产品目录号#E5750)产生一系列巢式缺失
Analysis of RB Action in DNA Damage Checkpoint Response
checkpoint response: (1) transcriptional repression of E2F-regulated genes (cyclin A reporter assay); (2) induction of cell cycle arrest (Brd-U incorporation assay); and (3) inhibition of DNA double-strand break accumulation (phosphorylated-histone H2A.X
(1992) The oligonucleotides we use are kits, contaning 20 decamers, from Operon Technologies Inc. . I. DNase I treatment of RNA mix and incubate for 30 min. at 37 °C : 50 µgRNA, 10 µl RNase inhibitor (1 U/µl), 1 µl
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