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- LABIO
- LBW0336
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
10ml
产品简介： 1. 抗荧光衰减封片剂以高纯度甘油为基础，内含抗荧光淬灭剂，有强烈的抗荧光衰减作用，用于对荧光组织和细胞样品的封片。样品封片后4ºC或－20ºC避光保存2-3周，可最大限度延长荧光持续时间和维持荧光发光强度，同时封片剂中的其它成分有助于保持组织抗原抗体处于结合状态。本试剂操作简单，在封片时用枪滴一滴抗荧光淬灭封片液，盖上盖玻片即可。 2. 抗荧光衰减封片剂内含DAPI即4'6-二脒基-2-苯基吲哚(4'6-diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用与荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。分子式为C16H15N5·2HCl ，分子量为350.25 ，CAS Number 28718-90-3。 3. DAPI可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %) ，且对活细胞无毒副作用。DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟，在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。 DAPI的最大激发波长为340nm，最大发射波长为488nm， DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为360nm，最大发射波长为460nm
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文献和实验相关实验
纸吸干爬片上的液体，用含抗荧光淬灭剂的封片液封片，在荧光显微镜下观察采集图像。
膜染色 孵育 24 小时后，弃去孵育液，用 PBS 清洗细胞 3 次 配制所需染色工作液体积 加入 300μL 色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞 37℃ 避光孵育细胞 8 min。 吸除细胞膜染色工作液，或 PBS 洗涤 3 次，每次 5 min 使用 4% 多聚甲醛在室温下固定 10 min 后观察细胞形态 弃去 4% 多聚甲醛，用 PBS 清洗细胞 3 次，每次 5 min 取出细胞爬片，用含 DAPI 封片剂进行封片 激光共聚焦拍照 3.2. 细胞骨架染色 孵育 24 小时后，弃去孵育
PBST， 在摇床上缓慢摇动洗涤5 min，共洗涤3次。 5. 荧光二抗孵育 用吸水纸吸尽洗涤液后滴加稀释好的荧光二抗，湿盒中孵育1h后，回收二抗，接着用PBST洗3次，每次5 min；由于荧光容易淬灭，故从加荧光二抗起，后面所有操作步骤都要避光。 6. 复染核（定位的关键） 在玻片上滴加DAPI，并注意避光孵育5min，对标本进行染核，然后用PBST洗3次，每次5min，洗去多余的DAPI。 7. 封片 用吸水纸吸干爬片上的液体，用含抗荧光淬灭剂的封片液封片，然后在荧光显微镜下观察
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
抗荧光衰退封片剂（含DAPI）
￥118.80
