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- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
10ml
产品简介: 1. 抗荧光衰减封片剂以高纯度甘油为基础,内含抗荧光淬灭剂,有强烈的抗荧光衰减作用,用于对荧光组织和细胞样品的封片。样品封片后4ºC或-20ºC避光保存2-3周,可最大限度延长荧光持续时间和维持荧光发光强度,同时封片剂中的其它成分有助于保持组织抗原抗体处于结合状态。本试剂操作简单,在封片时用枪滴一滴抗荧光淬灭封片液,盖上盖玻片即可。 2. 抗荧光衰减封片剂内含DAPI即4'6-二脒基-2-苯基吲哚(4'6-diamidino-2-phenylindole),是一种能够与DNA强力结合的荧光染料,常用与荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。分子式为C16H15N5·2HCl ,分子量为350.25 ,CAS Number 28718-90-3。 3. DAPI可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用,可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,和EB相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞,荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %) ,且对活细胞无毒副作用。DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟,在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。 DAPI的最大激发波长为340nm,最大发射波长为488nm, DAPI和双链DNA结合后,最大激发波长为360nm,最大发射波长为460nm
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文献和实验相关实验
纸吸干爬片上的液体,用含抗荧光淬灭剂的封片液封片,在荧光显微镜下观察采集图像。
膜染色 孵育 24 小时后,弃去孵育液,用 PBS 清洗细胞 3 次 配制所需染色工作液体积 加入 300μL 色工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞 37℃ 避光孵育细胞 8 min。 吸除细胞膜染色工作液,或 PBS 洗涤 3 次,每次 5 min 使用 4% 多聚甲醛在室温下固定 10 min 后观察细胞形态 弃去 4% 多聚甲醛,用 PBS 清洗细胞 3 次,每次 5 min 取出细胞爬片,用含 DAPI 封片剂进行封片 激光共聚焦拍照 3.2. 细胞骨架染色 孵育 24 小时后,弃去孵育
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