Negative Control sgRNA #1

目前，CRISPR基因编辑最简便的方法是核糖核蛋白复合物（RNP）导入，CRISPR-Cas9 RNP（核糖核蛋白复合物）由化学合成的gRNA（crRNA和tracrRNA）及Cas9蛋白组成，化学合成的gRNA（crRNA和tracrRNA）与Cas9蛋白混合后可搭配转染试剂，直接转染细胞，能快速实现靶基因的编辑。

gRNA的种类主要有2-piece crRNA：tracrRNA和Singel guide RNA（sgRNA）两种；2-piece gRNA在使用前crRNA：tracrRNA需要经过退火形成复合物，可经过化学改良人工合成这种gRNA；sgRNA使用前无需要经过退火，可以经过化学改良人工合成，也可以通过质粒表达或体外转录 (IVT)获得sgRNA。两种gRNA的结构如下图所示：

图1. 2-piece gRNA和sgRNA结构图

  对于不同来源的gRNA比较基因编辑效果发现，sgRNA不仅获取简单，而且具有很多优势，比如：编辑效率高、合成纯度高、可经过化学改良、容易被细胞接受、实验操作简单、可降低非靶副作用等。

 

Synthego 独家CRISPRevolution Synthetic RNA与Plasmid 和IVT获得的sgRNA进行比较具有合成简单、编辑效率高、脱靶效率低的诸多优势。

图2. 不同来源gRNA优势比较

 

    Synthego提供RUO、HPLC、GMP级别三种纯化方式的sgRNA合成服务，满足大家在科研实验、临床前验证、临床治疗的应用需求；同时，我们还提供Syntheo独家生信算法平台-CRISPR Design Tool，免费供大家用于gRNA设计；

同时，Synthego提供化学修饰的sgRNA，可防止原代细胞中的免疫反应，防止外切酶的作用，还可以增强 gRNA 在细胞内的稳定性；同时，只有人工合成的引导RNAs才能被化学修饰改良。

具体修饰方法：2’-O-methyl analogs 3 phosphorothioate interlinkages on the three 5’ and 3’ terminal bases。

 

GMP sgRNA生产交付：

当您准备开始订购GMP sgRNA时，Synthego的定制和生产团队就会跟进您的项目需求。为确保整个项目进程及客户满意度，我们的采购流程分为两个阶段：1）下单和审批；2）生产和运输。

图3. Synthego GMP sgRNA生产交付流程

 

产品汇总：