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- 详细信息
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57
- 英文名:
Anti-PKM Monoclonal Antibody
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
瓶
| 产品名称 | Anti-PKM Monoclonal Antibody |
| 英文名称 | Anti-PKM Monoclonal Antibody |
| 货号 | BH-DB8038 |
英文名称:Anti-PKM Monoclonal Antibody
宿主: Mouse
别名: CTHBP;HEL-S-30;OIP3;PK3;PKM2;TCB;THBP1
应用: WB IF
稀释比例: WB 1:1000. ICC 1:400.
蛋白分子量: 60kDa
Gene ID: 5315
保存: Store at -20°C. Avoid freeze / thaw cycles.
储存液: Buffer: PBS with 0.02% sodium azide, 50% glycerol, pH7.3.
纯化方法: Affinity purification
亚型: IgG1
免疫原: Purified recombinant human PKM protein fragments expressed in E.coli.
性状: 液体
Subcellular Locations: Cytoplasm Nucleus
Swiss Prot: P14618
克隆号: 1A7-G6-H6
克隆类型: Monoclonal Antibody
注意事项:
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
免疫球蛋白:
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操作步骤:
根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
温馨提示:
工作液与浓缩液选择的技巧,以及各自的优势。
1,工作液的优势:工作液操作方便,降低实验操作步骤,对于要求无菌的实验,降低染菌风险。
2,浓缩液的优势:浓缩液成本相对较低,实验范围更广,对于不要求无菌的实验,可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高,保存更加稳定。
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文献和实验指仅对一种抗原决定基的纯粹的抗体。这类抗体不可能通过将抗原 胞的 Hybridoma,在试管内制成了纯粹的单克隆抗体。用某种抗原使动物产生免疫感应,对应于抗原之不同部分可制成各种不同的抗体复合体。然而,因为一个产生抗体的细胞,只能产生一种抗体,所以骨髓肿瘤细胞与产生抗体细胞间的细胞杂种,可形成边产生抗体边增殖的 hybridoma,将每个杂种细胞进行克隆(无性繁殖系)培养,则一个克隆的细胞群只由单种类产生同一抗体的细胞所组成,这样得到的就是单克隆抗体。此抗体在测定
Monoclonal Antibody Production
Order 6 six week old Balb/C mice and let the ARC know they are coming.Have your antigen ready for when they arrive.Once they get there earmark the mice and perform a pre-bleed on them to be used as an ELISA control for monitoring the titer
a simple ELISA method to detect human anti-antibody response.
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