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室温,12个月
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深圳子科生物
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500ml
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文献和实验采用醋酸纤维薄膜作业支持物的电泳方法,称为醋酸纤维薄膜电泳。醋 酸纤维素是纤维素的羟基乙酰化所形成的纤维素醋酸酯。将它溶于有机溶剂 (如丙酮、氯信、氯乙烯、乙酸、乙酯等)后,涂抹成均匀的薄膜,干燥后 就成为醋酸纤维薄膜。现有国产醋酸纤维薄膜成品出售。醋酸纤维薄膜具有 泡沫状的结构,厚度约为120μm,有很强的通透性,对分子移动阻力很小。 醋酸纤维膜电泳是近年来推广的一种新技术。目前已广泛应用于科学实 验、生化产品分析和临床
蛋白质变性或由于热效应引起缓冲液中水分蒸发,使缓冲液浓度增加,造成膜片干涸。电流过低,则样品泳动速度慢且易扩散。 5、染色液的选择 对醋酸纤维素薄膜电泳后染色应根据样品的特点加以选择。其原则是染料对被分离样品有较强的着色力,背景易脱色;应尽量采用水溶性染料,不宜选择醇溶性染料,以免引起醋酸纤维素膜溶解。应控制染色时间。时间长,薄膜底色深不易脱去;时间短,着色浅不宜区分,或造成条带染色不均,必要时可进行复染。 6、透明及保存 透明液应临用前配制,以免冰乙酸及乙醇挥发影响透明效果。这些试剂最好选用
乙醇溶液或其它透明液处理后可使膜透明化有利于对电泳图谱的光吸收扫描测定和膜的长期保存。 ⒈材料与试剂 醋酸纤维素膜一般使用市售商品,常用的电泳缓冲液为pH8.6的巴比妥缓冲液,浓度在0.05-0.09mol/L。 ⒉操作要点 ⑴膜的预处理:必须于电泳前将膜片浸泡于缓冲液,浸透后,取出膜片并用滤纸吸去多余的缓冲液,不可吸得过干。 ⑵加样:样品用量依样品浓度、本身性质、染色方法及检测方法等因素决定。对血清蛋白质的常规电泳分析,每cm加样线不超过1μl
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