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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 保质期:
有效期至少一年
- 供应商:
上海谷研
- 保存条件:
-20℃保存
1.根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品名称:Hot Start Taq DNA Polymerase
别名:热启动酶热启动DNA聚合酶热启动TaqDNA聚合酶
储存条件:-20℃保存,有效期至少一年
HotStartTaqDNAPolymerase品是抗Taq单克隆抗体修饰的热启动TaqDNAPolymerase,高温加热前抗Taq单克隆抗体与Taq酶结合,抑制聚合酶的活性,从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq单克隆抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤已变性,因此无需特殊失活处理,在常规PCR反应条件下即可使用。在qPCR反应中,能明显提高荧光PCR的扩增效率(尤其对低拷贝数模板),改善其扩增曲线的完美度,其稳定性好、可重复性高、特异性强。此酶室温放置一周,酶活性仍可保持95%以上。 活性定义:1单位(U)TaqDNAPolymerase活力定义为在74℃,30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。 质量控制:SDS-PAGE检测TaqDNAPolymerase纯度大于99%;经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA;能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。 酶贮存缓冲液:20mMTris-HCl(pH8.0);0.1mMEDTA;1mMDTT;100mMKCl;50%glycerol;稳定剂 适用范围:用于小于6kb的对保真度要求不高的DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等,产物可以直接用于T/A载体克隆。 建议PCR条件:预变性温度是95度,时间为5-10分钟,其它的和普通Taq酶的反应条件一样。PCR体系(以50μl反应体系为例)Template<0.5μg上游引物(10μM) 1μl下游引物(10μM) 1μl10×Buffer(含Mg2+)5μldNTP(各2.5mM) 4μl热启动Taq酶 0.5-1μlddH2O upto50μl相关产品: PC1120 2×TaqPCRMasterMix(含染料) PC1300 PfuDNAPolymerase PC2200 dNTPsMix(10mMeach) D1020 10×DNA上样缓冲液 T1060 50×TAE缓冲液 G8142 GoldViewII型核酸染色剂(5000×)
注意事项:
● 溶液PE 第一次使用前请按瓶上标签加入4 倍体积的无水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 无水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 无水乙醇,使用后立即盖紧盖子。
● 本产品对电泳使用的Agarose 种类没有严格限制,可以使用普通Agarose 。为了保证回收DNA 的质量和DNA 回收效率,希望使用高纯度的Agarose ,但没有必要一定要使用低熔点的Agarose 等。
● 电泳时请使用新鲜配制的TAE 电泳缓冲液,以免影响电泳及回收效果。
● 请适当延长电泳时间,在条带分离清晰后进行切胶回收,以免回收到多余杂带。
● 为提高DNA 回收收率,切胶时应尽量除去多余的胶块。
● 本试剂盒纯化柱的DNA 吸附能力强。但如果DNA 浓度小,或DNA 初始量少,回收率将会偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 片段可直接用于各种酶促反应等,不会影响后续试验。
● 为了保证回收效率,请不要使用未调整pH 值的超纯水洗脱目的片段。
● 请严格按照操作步骤操作。
使用方法:
一:用新鲜组织样品
1. 估计完全浸没样品所需要本产品的体积(1g组织需10mL)。
2. 标记收集管并加入估计所需量的本产品。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于0.5cm的碎块。
注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
4. 将组织碎块完全浸没于收集管的本产品中。
5. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超过该温度下的zui长存放时间,如果要存放在-20℃或-80℃,需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到zui后的温度。注:将样品转移到-20℃或-80℃前,需要倒弃保护液。常见存放温度与其zui长存放时间关系为如下:
6. 从存放处取出样品 (-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化),用消过毒的镊子将组织碎块从保护液中取出。
7. 立即开始RNA 提取或进行其他处理 (如将样品分割成更小的碎块再重新保存等)。注:样品可以反复冻融二十次而其 RNA 质量不会受到影响。
以下是Hot Start Taq DNA Polymerase的相关产品:
DNMT3A Polyclonal Antibody 种属 :Clitocybe│maxima英文: DNMT3A Polyclonal Antibody培养方法
ROCK2 Polyclonal Antibody 种属 :Agaricus│bisporus英文: ROCK2 Polyclonal Antibody培养方法
MYD88 Polyclonal Antibody 种属 :Pleurotus│cornucopiae英文: MYD88 Polyclonal Antibody应用领域:食用
UBE2V1 Polyclonal Antibody 种属 :Volvariella│volvacea英文: UBE2V1 Polyclonal Antibody培养方法
RGS10 Polyclonal Antibody 种属 :Ganoderma│tropicum英文: RGS10 Polyclonal Antibody培养方法
DCP2 Polyclonal Antibody 种属 :Fomes│lignosus英文: DCP2 Polyclonal Antibody培养方法
HPSE2 Polyclonal Antibody 种属 :Tyromyces│subcaesius英文: HPSE2 Polyclonal Antibody培养方法
SERPINB6 Polyclonal Antibody 种属 :Cordyceps│cicadicola英文: SERPINB6 Polyclonal Antibody 模式菌株:no
ADAM12 Polyclonal Antibody 种属 :Trametes│trogii英文: ADAM12 Polyclonal Antibody 模式菌株:no
CLIP1 Polyclonal Antibody 种属 :Pleurotus│pulmonarius英文: CLIP1 Polyclonal Antibody培养方法
GBA3 Polyclonal Antibody 种属 :Lyophyllum│sp.英文: GBA3 Polyclonal Antibody培养方法
ZBTB20 Polyclonal Antibody 种属 :Leucocoprinus│sp.英文: ZBTB20 Polyclonal Antibody培养方法
TRAF3 Monoclonal Antibody 种属 :Geastrum│caespitasum宿主: Mouse 培养方法
MFAP2 Polyclonal Antibody 种属 :Cordyceps│nutans英文: MFAP2 Polyclonal Antibody培养方法
RUFY1 Polyclonal Antibody 种属 :Ganoderma│applanatum英文: RUFY1 Polyclonal Antibody培养方法
CFLAR Polyclonal Antibody 种属 :Laetiporus│sulphureus英文: CFLAR Polyclonal Antibody培养方法
Hot Start Taq DNA Polymerase人白细胞介素16elisa检测试剂盒
英文名称:Human IL-16 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:8 pg/ml
检测目标:IL-16
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验Hot Start activation approaches are increasingly being used to improve the performance of PCR. Since the inception of Hot Start as a means of blocking DNA polymerase extension at lower temperatures, a number of approaches have been developed
for both DNA sample and reaction mixture preparation, is strongly recommended.The reagents for PCR should be prepared separately and used solely for this purpose. Autoclaving of all solutions, except dNTPs, primers and Taq DNA Polymerase is recommended
The Polymerase Chain Reaction (PCR)
• Template DNA • Reaction buffer (Tris, ammonium ions(and/or potassium ions), magnesium ions,bovine serum albumin) • Nucleotides (dNTPs) • Primers • DNA polymerase (usually Taq) PCR In Detail • Denature, anneal, extend and repeat the cycle 30 to 35
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