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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Rabbit anti-Guinea pig IgG/HRP
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
瓶
产品名称：兔抗豚鼠IgG-HRP
英文名称 Rabbit anti-Guinea pig IgG/HRP
储存条件 -20°C
单位 瓶
酶标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。目前较为常用的是将辣根过氧化物酶(HRP)，氧化法标记而成。每种成品已加入一定浓度的BSA作为稳定剂。产品的工作浓度根据方法不同而别，用前最好-20℃冻存，避免反复化冻。
应用范围：
抗原决定族的抗原性分析鉴定，各种抗原、抗体的定量、定性及定位分析测定等。
| 产品名称 | 兔抗豚鼠IgG-HRP |
| 英文名称 | Rabbit anti-Guinea pig IgG/HRP |
| 货号 | BH-DB6707 |
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
2． 每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；
3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；
4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；
2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL～1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL～0.5 mL |
6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
固定液的应用：
1．单纯固定液(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以pH7 2～7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1．单纯固定液
(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以 pH 7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效
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文献和实验我是用来做筛选IgG型单克隆抗体,用它做二抗,筛到的阳性克隆化和扩大培养后用SIGMA亚类试剂盒鉴定却是IgM,郁闷!!!这个试剂盒能与IGM交叉?是不是抗轻链?我这种方式不对吗?谁知道有较好的抗鼠IgG而与IgM不交叉的抗体?? 试剂盒说明书:Anti-mouse IgG-HRP Antibody FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN HUMANS. R&D Systems, Inc. 1-800-343-7475 2/21/06
和第3支空试管中，然后往第2支试管中加0.1ml抗HRP，往第3支试管中加0.1mg/ml HRP 0.1ml； 5. 混匀，在室温放1h后观察。如第2支试管中产生沉淀，说明其对应的第1支反应管中抗原过量；如第2支试管中不产生沉淀，而第3支试管中产生沉淀，说明其对应的第1支反应管中抗体过量； 6. 制备PAP时，HRP的浓度应选取抗原过量管的前一管。 [附注2] 兔（或羊）抗HRP的制备 1. 兔抗HRP的制备：取HRP1mg溶于生理盐水中，加弗氏完全佐剂1ml充分乳化
试剂及配制 1. HRP和兔（或羊）抗HRP：抗HRP用HRP免疫兔（或羊）获得。 2. 0.075mol/L醋酸钠-0.15 mol/L醋酸铵等量混合液 3. 0.1mol/LHCl和0.01mol/LHCl 4. 饱和硫酸铵溶液 5. 0.01mol/L NaOH 操作方法 1. 取兔（或羊）抗HRP血清5ml，16000r/min离心20min，去沉淀； 2. 于收集的上清中加入HRP(2mg/ml)溶液1ml，室温缓慢搅拌1h，同上离心；
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