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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
30
- 供应商:
上海谷研
- 保存条件:
常温保存
- 规格:
瓶
别名:SurfaceRNaseErasol
储存条件:常温保存
外观(性状):液体
单位:瓶
固相RNase清除剂产品简介:固相RNase清除剂(SurfaceRNaseErasol)是独家开发的特殊的RNase灭活剂。它含有的多种成分能够高效灭活固体表面的RNase污染,保障RNA工作环境的清洁。1.高效。本产品原液能在5分钟内将固体表面的多达100ug的RNase彻底灭活,效力和速度远远高于常用的DEPC。2.能灭活RNaseT1、RNaseH、BAL31、S1、Mungbeannuclease等RNase和DNase。3.无毒。跟强致癌的DEPC不同,本产品对人体没有任何毒害。4.使用简单。处理后不需要高压灭菌。固相RNase清除剂使用方法: 1.水的处理直接将固相RNase清除剂原液按1:1000的比例加入到需要处理的水中,混合均匀后室温放置24小时即可直接使用,得到的水可以配制电泳溶液和裂解液。但如果需要溶解RNA,建议使用液相RNase清除剂。2.工作平台的清洁 直接将固相RNase清除剂原液或10倍的新鲜稀释液喷于台面,5分钟后用普通吸水纸擦净,最后用沾有固相RNase清除剂1000倍新鲜稀释液的吸水纸擦净,晾干。注意:由于一般的工作平台RNase污染都很严重,建议使用固相RNase清除剂原液或十倍的新鲜稀释液(新鲜稀释液的存放时间不要超过一天),不要使用稀释度大于十倍的稀释液。3.实验仪器的清洁 用浸有固相RNase清除剂原液或10倍的新鲜稀释液的纸擦拭仪器表面,再用吸水纸擦净,最后用沾有固相RNase清除剂1000倍新鲜稀释液的吸水纸擦净,晾干。用固相RNase清除剂原液处理金属器械的时间不能超过5分钟。注意:由于一般的实验仪器RNase污染都很严重,建议使用固相RNase清除剂原液或十倍的新鲜稀释液(新鲜稀释液的存放时间不要超过一天),不要使用稀释度大于十倍的稀释液。4.玻璃和塑料器皿的清洁将器皿浸泡在固相RNase清除剂的10或100倍的新鲜稀释液中,静置处理5分钟后取出,再用固相RNase清除剂1000倍或10000倍新鲜稀释液浸泡二次以上,倒立晾干后备用。 注意:由于一般的清洗后的玻璃和塑料器皿的RNase污染都比较严重(但一般比工作平台和实验仪器干净),建议第一次浸泡使用固相RNase清除剂的10倍或100倍新鲜稀释液(新鲜稀释液的存放时间不要超过一天),不要使用稀释度大于1000倍的稀释液。
作用及原理:
⒈溶液I—溶菌液:
溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II-NaOH-SDS液:
NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。
但当pH>12或pH<3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。
固相RNase清除剂在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L,加抽提液时,该系统的pH就高达12.6,因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS:SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:
(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
(2)解聚细胞中的核蛋白。
(3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA时)受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理,可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一,盐析即在高浓度Nacl溶液中,蛋白质析出的现象。原理如下
(1)Nacl溶液与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;
(2)Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出;
2.不同浓度下DNA分子构象(三维结构)不同,不同的构象溶解度也不同。
(1)当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时,DNA溶解度最小,因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出;
(2)DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高;
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液,使得蛋白质析出,而DNA溶解度较大,通过高速离心,取上清并去除沉淀,进而去除蛋白质。
DNA沉淀剂:
原则:不与DNA反应,对其无影响。
1.纯乙醇(二倍体积比);效率高,需要放置的时间短,在公司用Kit提取的时候,没有放置直接进行下一步;确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇,价格相对于纯乙醇便宜,但是会损失DNA;
3.异丙醇(0.6倍体积);
(1)普通细胞上清液体,静止15-30min即可沉淀;
(2)对于含量低,或者组织(比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA),则最好在-20℃放置2h或者以上,
本人提取肝脏组织DNA时候,最长时间放置了三天,对结果并无影响;上周提取细胞中cccDNA的时候,室温放置了15min,结果提出的DNA含量也挺高的,而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高,所以时间短点也可以,但是如果时间不是很着急,还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品:
BMP6 Polyclonal Antibody 种属 Mortierella│sp.英文: BMP6 Polyclonal Antibody 模式菌株no
ADAM2 Polyclonal Antibody 种属 Macrocybe│crassa (Sacc.) Pegler & Lodge英文: ADAM2 Polyclonal Antibody 模式菌株no
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C1GALT1C1 Polyclonal Antibody 种属 Rhizobium│sp.英文: C1GALT1C1 Polyclonal Antibody 模式菌株no
SPR Polyclonal Antibody 种属 Rhizobium│sp.英文: SPR Polyclonal Antibody 模式菌株no
AP2A1 Polyclonal Antibody 种属 Rhizobium│sp.英文: AP2A1 Polyclonal Antibody 模式菌株no
ENO2 Polyclonal Antibody 种属 Mucor│sp.英文: ENO2 Polyclonal Antibody 模式菌株no
ARID1A Polyclonal Antibody 种属 Isaria│cicadae Miq.英文: ARID1A Polyclonal Antibody 模式菌株no
固相RNase清除剂大鼠L选择素elisa检测试剂盒
英文名称:Rat L-Selectin ELISA KIT
反应性:Rat
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:30 pg/ml
检测目标:L-Selectin
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验前言自从1963年MERRIFIELD发展成功了固相多肽合成(SPPS)方法以来,经过不断的改进和完善,到今天这个方法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,表现出了经典液相合成法无法比拟的优点。固相合成的主要设计思想是:先将所要合成肽链的羟未端氨基酸的羟基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连,然后以此结合在固相载体上氨基酸作为氨基组分经过脱去氨基保护基,并同过量的活化羟基组分反应接长肽链。重复(缩合-洗涤-去保护-中和和洗涤-下一轮缩合)操作,达到所要合成的肽链长度;最后将肽链从树脂
杂交进行定性或定量分析的最有效方法是将一种核酸单链用同位素或非同位素标记成为探针,再与另一种核酸单链进行分子杂交。随着基因工程研究技术的迅猛发展,新的核酸分子杂交类型和方法在不断涌现和完善。核酸分子杂交可按作用环境大致分为固相杂交和液相杂交两种类型:一、固相杂交将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,一条反应核酸游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。由于固相杂交后,未杂交的游离片段可容易地漂洗除去,膜上留下的杂交物容易检测和能防止靶 DNA 自我复性等优点
) 能nca 就是就是撒,节省节省再节省,结果实验老出问题撒 zjubell 98074015 wrote: 有这么麻烦,直接买axygen的无RNA酶的枪头不成吗。 中国的老板啊,就是不让学生用好一点的东西,搞得一个个就跟民工似的(非贬义) 同意你的观点,买点RNase free的也真的不贵,35元/盒,但你浸了半天,效果可能还不好,却因此花了一两天的人力。按现在3-5K/
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