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TE缓冲液(PH=8.0).

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  • 上海谷研
  • GOY-C6325
  • 进口、国产
  • 2025年12月09日
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    • 英文名

      TEBuffer(pH8.0)

    • 保质期

      有效期1年

    • 供应商

      上海谷研

    • 保存条件

      RT

    • 规格

       瓶

    作用及原理:
    ⒈溶液I—溶菌液:
    溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。
    葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。
    EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
    ⒉溶液II-NaOH-SDS液:
    NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。
    但当pH>12或pH<3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。
    TE缓冲液(PH=8.0).在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L,加抽提液时,该系统的pH就高达12.6,因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
    SDS:SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:
    1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
    2)解聚细胞中的核蛋白。
    3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA时)受到干扰。

    产品细节图片1
    根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理,可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
    1.Nacl是常用的盐析材料之一,盐析即在高浓度Nacl溶液中,蛋白质析出的现象。原理如下
    1)Nacl溶液与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;
    2)Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出;
    2.不同浓度下DNA分子构象(三维结构)不同,不同的构象溶解度也不同。
    1)当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时,DNA溶解度最小,因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出;
    2)DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高;

    产品细节图片2
    3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液,使得蛋白质析出,而DNA溶解度较大,通过高速离心,取上清并去除沉淀,进而去除蛋白质。
    产品名称:TE缓冲液(PH=8.0).
    英文名称:TEBuffer(pH8.0)

    分子式:10mMTris-HCl,pH8.0;1mMEDTA
    储存条件:RT,有效期1年
    单位:瓶
    TE缓冲液是Tris+EDTA缓冲液,这种缓冲液我们一般用作溶解剂或保持剂,主要是调控PH。TAE是一种电泳缓冲液,主要用于DNA分子的电泳。 TE组成浓度:10mMTris-HCl1mMEDTAPH=8.0配制量:500ml配制方法:量取下列溶液于500ml烧杯中1MTris-HClBufferPH=8.05ml0.5MEDTAPH=8.01ml向烧杯中加入约400mlddH2O均匀混合;将溶液定容到500ml后;室温保存.TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。50×TAEBuffer配制方法:1.称量Tris242g,Na2EDTA.2H2O37.2g于1L烧杯中;2.向烧杯中加入约800ml去离子水,充分搅拌均匀;3加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解;4.加去离子水定容至1L后,室温保存。
    DNA沉淀剂:
    原则:不与DNA反应,对其无影响。
    1.纯乙醇(二倍体积比);效率高,需要放置的时间短,在公司用Kit提取的时候,没有放置直接进行下一步;确定是价格相对昂贵。
    2.95%乙醇,价格相对于纯乙醇便宜,但是会损失DNA;
    3.异丙醇(0.6倍体积);
    1)普通细胞上清液体,静止15-30min即可沉淀;
    2)对于含量低,或者组织(比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA),则最好在-20℃放置2h或者以上,
    本人提取肝脏组织DNA时候,最长时间放置了三天,对结果并无影响;上周提取细胞中cccDNA的时候,室温放置了15min,结果提出的DNA含量也挺高的,而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高,所以时间短点也可以,但是如果时间不是很着急,还是按照规定的时间来做比较保险。
    以下是公司正在热销的产品:
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    英文名称:Rat IgA ELISA KIT
    反应性:Rat
    样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
    灵敏度:2 ng/ml
    检测目标:IgA
    应用:Sandwich ELISA
     

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