- ￥798 - 1260
- 攸碧艾/YOBIBIO
- 中国上海
- U23-002A
- 2026年04月14日
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- 技术资料
- 保存条件：
-20°C
- 保质期：
1年
- 英文名：
Calcein-AM/PI
- 库存：
500
- 供应商：
上海攸碧艾生物
- 规格：
500T/1000T
| 规格： | 500T | 产品价格： | ￥798.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 1000T | 产品价格： | ￥1260.0 |
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产品描述：
本产品是一种基于Calcein-AM（钙黄绿素AM）和PI（碘化丙啶）的双荧光染色法快速便捷地检测体外培养的细胞中活细胞和死细胞的试剂。
Calcein-AM是一种可以对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，因其在传统的Calcein（钙黄绿素）基础上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基团，增加了疏水性，使其能够轻易穿透活细胞膜。一旦进入细胞，本身不发荧光的Calcein-AM被活细胞内的酯酶水解，形成膜非渗透性的带有强负电荷的极性分子Calcein，从而被滞留在活细胞内并发出强绿色荧光(Ex=490nm, Em=515nm)。由于死细胞缺乏酯酶或酯酶活性很低，因此死细胞不能或很少产生Calcein，不能被染色或者染色非常弱。Calcein-AM仅用于对活细胞的细胞生存能力测试和短期标记。
碘化丙啶(Propidium iodide, PI)不能穿过活细胞的细胞膜，仅能穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(Ex=535nm, Em=615nm)，因此PI仅对死细胞染色。因此，Calcein-AM常常与死细胞荧光探针如碘化丙啶(PI)等联合使用，同时进行活细胞和死细胞的荧光双重染色，用于细胞活性与细胞毒性的检测。
本试剂盒适用于荧光显微镜、荧光酶标仪及其它荧光检测系统。仅需染色15-30分钟，就可在荧光显微镜下观察到非常明亮的活细胞绿色荧光染色和坏死细胞中非常明亮的细胞核红色荧光染色。
使用说明：
1、配制Calcein-AM/PI工作液：（推荐Calcein-AM：2μM, PI：4μM）分别取10μl的Calcein-AM和20μl的PI储存溶液，加入至5ml的PBS中，充分混匀，备用（注：Calcein-AM/PI工作液必须现配现用，并且在当天用完）。
2、去除细胞培养液，用PBS洗涤细胞2次，去除培养液中的血清或酚红对本实验的干扰。
3、加入适量的Calcein-AM/PI工作液（细胞被覆盖完全即可，建议96孔板每孔100μl，24孔板每孔加入250μl，12孔板每孔加入500μl，6孔板每孔加入1ml），在37℃培养箱中孵育15-30min（不同的细胞最佳孵育时间有所不同，可以根据实际染色效果对染色时间进行适当调整和优化，以得到更加理想的染色效果）。
4、用PBS洗涤细胞2次。
5、荧光显微镜下观察细胞染色结果，Calcein-AM检测波长：Ex=490nm（蓝光激发）, Em=515nm；PI检测波长：Ex=535nm（绿光激发）, Em=615nm。
注意事项：
1、本产品为荧光染料，请注意避光保存和使用，以减缓荧光淬灭。
2、使用前先将低温保存的试剂在室温条件下放置 20-30min。
3、建议第一次使用时对本产品进行分装，以减少反复冻融次数。
4、由于 Calcein-AM 在水溶液中不稳定，Calcein AM 检测工作液须现配现用，不能配制后冻存。
5、培养液中的血清和酚红可能会干扰 Calcein-AM 染色，使荧光背景增强，染色前请先用 PBS 洗涤细胞。
6、碘化丙啶(PI)有一定的致癌性，操作时一定要注意防护。若接触到皮肤，需要立即用自来水清洗。
7、本产品仅作体外科研使用，不可用于临床诊断或治疗。
8、实验员请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
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文献和实验[1]Yinying Pu , Bangguo Zhou , Jinhong Bing , Liang Wang , Mingqi Chen , Yucui Shen , Shuang Gao , Min Zhou , Wencheng Wu , Jianlin Shi.Ultrasound-triggered and glycosylation inhibition-enhanced tumor piezocatalytic immunotherapy.Nature Communications ( IF 15.7 ) Pub Date : 2024-10-18
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International Journal of Biological Macromolecules ( IF 8.5 ) Pub Date : 2025-09-17 , DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2025.147767
：a. 电脑操控软件；b. 双荧光和明场成像：用于AO/PI荧光染料或台盼蓝检测活死细胞。c. 不仅仅可以用于细胞计数，细胞活力分析，还可以选配FCS EXPRESS流式软件进行细胞凋亡、细胞周期、转染后GFP蛋白表达等的检测分析。推荐：原代细胞计数和活力分析的最佳选择；以及除了细胞计数，还想进行细胞功能检测的实验室仪器选购对象。3）X2型号—双荧光酵母细胞活力分析仪Nexcelom公司系列计数仪的优势之一就是针对不同的需求，进行了仪器的细分类。用户可根据自己的需求来选择适合
方法。O（吖啶橙）和 PI（碘化丙啶）是可对 DNA染色的细胞核染色试剂。其中 AO可以通过完整的细 胞膜，嵌入所有细胞（活细胞和死细胞）的细胞核，呈现绿色荧光；PI只能通过不完整的细胞膜，即死细胞的细胞膜，嵌入所有死细胞的细胞核，呈现红色荧光。 活死单个核细胞可呈现荧光信号。而成熟的 红细胞及血小板，因为没有细胞核，不能被 AO/PI 染色，因此可以完全被排除在外不被 计数。 通过 AOPI染料进行双荧光计数和活力分析，可以精确计数分离后的 PBMC以及活力分析，亦可进 行全血中的
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