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上海泽叶生物科技有限公司
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大量
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100ml/500ml
一、特级类胎牛血清(专用于干细胞的胎牛血清)
1、Hyclone 北美特级胎牛血清(SH30070.03)
目前,性能好的血清,实验室反馈不错的,那就是Hyclone SH30070.03的特级胎牛血清, Hyclone的“头牌”。
这款血清--Hyclone特级胎牛血清(Defined FBS),货号:SH30070,是世界上唯一经过40纳米过滤的顶级胎牛血清,极佳的促细胞生长作用及产品稳定性。内毒素含量小于10EU/ml,血红蛋白含量小于10mg/dl。此血清可以广泛用于各种细胞培养,包含任何干细胞系的培养。
2、Gibco北美特级胎牛血清(16000-044)
GIBCO公司在美国原装生产的特级胎牛血清,货号:16000-044,是100nm过滤3次,内毒素和血红蛋白含量都可以与Hyclone的SH30070.03相媲美。也可以用于培养大部分的干细胞系。
二、优等类胎牛血清
1、Hyclone加拿大优等胎牛血清(SH30396)
性价比高的是Hyclone加拿大优等胎牛血清(Characterizend FBS),货号:SH30396,血清采自加拿大,由Hyclone公司总部的员工采集加工,采集方法,加工过程,检定标准与美国原产优等胎牛血清完全一致,市场价格低于美国原产的。经过3次100nm过滤,内毒素含量小于25EU/ml,血红蛋白含量小于25mg/dl。此血清,在2005年以前,是很多实验室选择血清的选,价格适中,质量过硬,应用细胞非常广泛。
2、Hyclone澳大利亚优等胎牛血清(SH30084)
基本与加拿大的优等血清是一样的,级别也非常相似,各种级别都有。
3、Gibco澳大利亚胎牛血清(10099-141)与Hyclone澳大利亚胎牛血清差不多,这一级别的血清,也能用于干细胞培养,可是,不象特级胎牛血清那么优秀。
三、普通进口胎牛血清 Hyclone南美胎牛血清(SV30087)
目前市场上用的最多的Hyclone血清是南美胎牛血清(FBS) SV30087 ,此血清采自南美,在国内(兰州)过滤并测试检验,经三次100纳米过滤,根据中国商标法的规定标贴中文标签,内毒素含量小于等于10EU/ml,血红蛋白含量小于等于20mg/d。此血清广泛用于各种肿瘤细胞的培养,还没有资料记载能够用于干细胞,也听说有少数人用于干细胞培养的,不过,因为本身血红素比较高,所以,不要用于干细胞。
- 国产胎牛血清
- 性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
- 蛋白质含量 3.5%~5.0%( w/v)
- 血红蛋白含量 ≤0.02%( w/v)
- 无菌检验 阴性
- 支原体检验 阴性
- 细菌内毒素 ≤5(EU/ml)
- 牛腹泻病毒 阴性
- 大肠杆菌噬菌体 阴性
- 支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生长曲线(接种浓度)最大增殖浓度≥2.5×106 个/ml 细胞倍增时间 ≤15h 克隆率≥85%血清的主要成分: 血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
- 胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。 显然,胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。功能:牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
- 提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
- 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
- 有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
- 是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
- 起酸碱度缓冲液作用。
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文献和实验肉汤中,放于4°C保存4d后进行以下实验。 1.2 胃粘膜组织尿素酶试验 参考Christensen尿素肉汤培养和Morris等快速诊断法,采用2%液体尿素常规法,于4h及24h观察结果。 1.3 细菌分离培养及纯化 在灭菌研磨器中将胃粘膜组织研磨成匀浆,涂于含6%脱纤维绵羊血的布氏琼脂平板(含TMP5mg/L,万古霉素6mg/L及多粘菌素B4mg/L)中,将平板置于含10%CO2 2 、5%O 2
。 加入2 mL 1×红细胞裂解液重悬细胞,室温裂解2~3 min后,立马加入10 mL PBS,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬脾脏细胞,将细胞悬液用200目筛网再次过滤后计数, 并调整细胞浓度至1×107/mL。 b) 吹打法 小鼠颈椎脱臼处死,置于75%乙醇浸泡5 min后,取出小鼠,置于无菌操作台上,左腹侧朝上。 小鼠左腹侧中部剪开小口,撕开皮肤,暴露腹壁,可见红色长条状脾脏。 脾脏下侧提起腹膜,剪开后上翻,暴露出脾脏,用镊子提起脾脏,眼科剪分离脾脏下面
),剪去两端软骨,露出红色的骨髓腔。注意在该过程中应保留尽可能多的骨髓腔。 拿一支1 mL的无菌注射器,吸取1 mL PBS,轻轻插入骨髓腔,冲洗骨髓腔以获得骨髓。重复2~3次,可冲出绝大部分细胞。冲洗完后,用移液器轻轻吹打细胞,将细胞团吹散。 将冲洗液用200目的滤网过滤,滤液收集于15 mL离心管中,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞,细胞计数,并调整细胞浓度至1×107/mL。 注意事项: 骨髓样本细胞分群明显,可以裂解红细胞,也可不裂解。如需裂解红细胞,可以加入
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