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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
20
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
瓶
规格:100ml,200ml,500ml(本产品规格可根据客户需求)
单位:瓶
保存方式及年限:五年
运输方式:快递
血清就是给细胞提供营养的,例如你培养细胞时细胞培养基中也需要加血清一样。
如果你培养的细胞是不含血清培养基培养,在选用冻存液时也一定要用无血清细胞冻存液了,这个就需要购买了。
另外自己配冻存液,可以是血清:DMSO=9:1,也可以是培养基:血清:DMSO=8:1:1
产品使用注意事项(仅供参考):
1.血清解冻最好采用逐步解冻法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解冻过程中必须随时轻摇,使血清受热温度均匀。
2.血清凝絮物,血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出,这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物,实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。
3.热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活,请严格按照56℃30分钟(水浴)处理已解冻血清。
4.常温状态下短期融化并不会影响血清质量。
5.产品有效期,检定合格之日起有效期5年。
无菌脱纤维鸡血是细胞培养中最重要的元素之一。在实验室操作中要注意及处理方法:
1. 血清保存: 建议血清应保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
2. 解冻血清的方法: 建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
3. 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?
血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
4. 为什么要热灭活血清?
加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
5. 无菌脱纤维鸡血有必要做热灭活吗?
实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保血清的质量!
6. 为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?
胎牛血清没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。
7. 如何避免沉淀物的产生?
解冻无菌脱纤维鸡血时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。
解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
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文献和实验成分 含1%胰蛋白胨的牛心浸液 200mL 1:25000结晶紫盐水溶液 10mL 1:800三氮化钠溶液 10mL 脱纤维兔血(或羊血) 10mL 制法 将上述已灭菌的各种成分,用无菌手续依次混合,分装于无菌试管内,每管约2mL,保存于冰箱内备用。
01%结晶紫溶液,羊血或兔血,肉膏蛋白胨琼脂培养基,酒精等。 四、操作步骤 1.观察圆褐固氮菌、枯草芽孢杆菌、灰色链霉菌、酿酒酵母、青霉的单个菌落特征,并按实验一菌落特征描述的方法记录结果。 2.血液琼脂培养基的制备: (1)成分pH7.6肉膏蛋白胨琼脂培养基10ml,无菌脱纤维羊血(或兔血)1ml。 (2)将肉膏蛋白胨琼脂培养基加热溶化。 (3)待冷至45℃时,以无菌操作加1ml无菌脱纤维羊血于培养
121℃高压灭菌15min,备用。此为布氏琼脂基础培养基。 2 临用前,加热溶解基础琼脂,冷至60℃。每100mL基础琼脂中,加入脱纤维羊血5mL、抗生素混 合液0.5mL及两性霉素B。头孢霉素混合液0.5mL,摇匀,倾注平板。 说明 1两性霉素B、头孢霉素混合液配法:称两性霉素B2mg和头孢霉素15mg与无菌蒸馏水5mL混合即成。 2称量抗生素必须正确,操作必须小心慎重。
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