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- 2025年07月12日
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详见说明书
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详见说明书
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
4°C保存
- 规格：
100T/盒
产品具有以下优点：
1、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
2、规范包被操作----吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高
3、先进的优化方案----重复性高，可靠性强
4、购买本公司的SKIL mRNA原位杂交试剂盒免费代测
5、技术服务要求：专业，规范，高效
6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
7、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等
8、可检测指标齐全：炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等
9、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，先进的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴。
参数规格：
产品名称 SKIL mRNA原位杂交试剂盒
规格:100T/盒
特异性: 人
标记方式: 3’—尾段标记
保存条件: 4°C保存一年
试剂盒内容:
1.SKIL寡核苷酸探针杂交液 2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.胃蛋白酶（×10;Pepsin） 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
试剂盒组份：
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
下列产品是公司正在热销的产品：
DNMT3L Polyclonal Antibody胰蛋白酶消化液(0.25%)不含EDTA和酚红英文名称: DNMT3L Polyclonal Antibody别名 胰酶
SENP5 Polyclonal Antibody胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚红英文名称: SENP5 Polyclonal Antibody别名 胰酶
TLK2 Polyclonal AntibodyDCFH-DA活性氧ROS荧光探针英文名称: TLK2 Polyclonal Antibody有效期1年
WSB1 Polyclonal Antibody碘化丙啶PI英文名称: WSB1 Polyclonal Antibody有效期4年
VENTX Polyclonal Antibody线粒体提取试剂盒英文名称: VENTX Polyclonal Antibody英文名称 mitochondrialextractionkit
ZUFSP Polyclonal Antibody碘化丙锭PI溶液(1mg/ml).英文名称: ZUFSP Polyclonal Antibody别名 碘化丙啶
HRASLS2 Polyclonal Antibody支原体检测试剂盒英文名称: HRASLS2 Polyclonal Antibody英文名称 MycoplasmaDetectionKit
ATRIP Polyclonal AntibodyDNA含量检测试剂盒（细胞周期）英文名称: ATRIP Polyclonal Antibody别名 DNA含量检测试剂盒
DARS Polyclonal AntibodyHoechst33258染色液（1mg/mL）英文名称: DARS Polyclonal Antibody别名 HOE33258
IL17RA Polyclonal Antibody钙荧光探针Fluo3-AM英文名称: IL17RA Polyclonal Antibody有效期1年
Cy5.5标记的兔抗长爪沙鼠IgGCCCP细胞凋亡诱导剂(50mM)英文名称: Rabbit MG IgG/Cy5.5英文名称 Carbonylcyanide3-chlorophenylhydrazone;m-Cl-CCP;Mesoxalonitrile3-chlorophenylhydrazone;(3-Chlorophenyl)hydrazonomalononitrile
ERRFI1 Polyclonal AntibodyCellcountingKIT-8(CCK-8)日本原装英文名称: ERRFI1 Polyclonal Antibody别名 WST-8
AGL Polyclonal Antibody细胞核提取试剂盒英文名称: AGL Polyclonal Antibody英文名称 NuclearExtractionKit
PARP3 Polyclonal AntibodyHoechst33342荧光染料.英文名称: PARP3 Polyclonal Antibody有效期3年
TARDBP Polyclonal AntibodyHoechst33342染色液(即用型)10ug/ml英文名称: TARDBP Polyclonal Antibody别名 bisBenzimideH33342;HOE33342
RUNX1T1 Polyclonal AntibodyDiI细胞膜橙色荧光探针英文名称: RUNX1T1 Polyclonal Antibody有效期1年
SKIL mRNA原位杂交试剂盒菌株类型:E.coli
培养基:LB培养基
生长条件:37 ℃, 有氧
基因型:F- dam-13::Tn9 dcm-6 hsdM hsdR zjj-202::Tn10 recF143 galK2 galT22 ara-14 lacY1 xyl-5 leuB6 thi-1 tonA31 rpsL136 hisG4 tsx-78 mtl-1 glnV44
抗性:25 µg/ml 氯霉素和25 µg/ml 卡那霉素
质粒转化条件:42 ℃热激/ 电转
应用:链霉菌基因操作
诱导方法:--
菌株特点:
ET12567(pUZ8002)在培养的过程中加入25 µg/ml 氯霉素和25 µg/ml 卡那霉素有助于维持细胞内的伴侣质粒存在。
ET12567(pUZ8002)主要用来进行链霉菌基因操作过程中，利用结合转移的方法将基因导入到链霉菌中，链霉菌基因敲除或者基因倍增过程中全球通用和认可的菌株。
ET12567(pUZ8002)是甲基化缺陷型菌株。大部分链霉菌能够通过甲基修饰系统区分出自身DNA和外来DNA，所以需要转入到链霉菌中的质粒都必须利用ET12567(pUZ8002)通过结合转移的方法进入链霉菌体内。如果使用的链霉菌不含有甲基化修饰系统，那么使用DH5a(pUZ8002)菌株也是可以完成结合转移的。
pUZ8002质粒含有tra基因，能够编码转移蛋白Tra，从而实现基因DNA转移。
ET12567(pUZ8002)配套使用载体是pSET152和pKC1139.
1、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
2、规范包被操作----吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高
3、先进的优化方案----重复性高，可靠性强
4、购买本公司的SKIL mRNA原位杂交试剂盒免费代测
5、技术服务要求：专业，规范，高效
6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
7、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等
8、可检测指标齐全：炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等
9、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，先进的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴。
参数规格：
产品名称 SKIL mRNA原位杂交试剂盒
规格:100T/盒
特异性: 人
标记方式: 3’—尾段标记
保存条件: 4°C保存一年
试剂盒内容:
1.SKIL寡核苷酸探针杂交液 2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.胃蛋白酶（×10;Pepsin） 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
试剂盒组份：
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
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DARS Polyclonal AntibodyHoechst33258染色液（1mg/mL）英文名称: DARS Polyclonal Antibody别名 HOE33258
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生长条件:37 ℃, 有氧
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质粒转化条件:42 ℃热激/ 电转
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菌株特点:
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pUZ8002质粒含有tra基因，能够编码转移蛋白Tra，从而实现基因DNA转移。
ET12567(pUZ8002)配套使用载体是pSET152和pKC1139.
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文献和实验相关实验
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