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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
53
- 英文名:
Goat anti-Equine IgG/RBITC
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
瓶
| 产品名称 | 羊抗马IgG-RBITC说明书 |
| 英文名称 | Goat anti-Equine IgG/RBITC |
| 货号 | YS-D4405 |
英文名称: Goat anti-Equine IgG/RBITC
储存条件: -20°C
单位: 瓶
其它:
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
使用方法:
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014),使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液,混匀,充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后,10000~14000 rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片;
(2) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1 mM;
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量,具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
(5) 充分裂解后,10000~14000rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项:
1、本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。
下列是羊抗马IgG-RBITC说明书的相关产品:
Rattus norvegicus (Rat)多粘菌素 B 溶
3,4-二氟SOCS-3 ELISA Kit
Homo sapiens (Human)培养基
8-溴辛酸酯SOCS-1 ELISA Kit
Homo sapiens (Human)甘露醇卵黄多粘菌素琼脂平板MYP
苄基缩水甘油cFn ELISA Kit
Mus musculus (Mouse)营养琼脂NA
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Homo sapiens (Human)营养琼脂平板NA
4-氯-5-氧基哒嗪-3(2H)-酮CYP2
羊抗马IgG-RBITC说明书磷酸化14-3-3E蛋白抗体phospho-YWHAE(Thr232)
14-3-3E蛋白抗体14-3-3 epsilon
软骨细胞蛋白39抗体CHI3L2
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y-盒结合蛋白1抗体YB1
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核转录调节因子YY1抗体YY1
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文献和实验β-hCG单抗 标记 100.00 羊抗HBsAg多抗 包被 160.00 鼠抗HBsAg单抗 标记 160.00 鼠抗HBeAg单抗 包被 200.00 鼠抗HBeAg单抗 标记 200.00 鼠抗甲胎蛋白单体 包被 200.00 鼠抗甲胎蛋白单体 标记 200.00 兔抗A族链球菌抗体 包被和标记 200.00 兔抗B族链球菌抗体 包被和标记 300.00 羊抗小鼠抗体 质控线 10.00 羊抗兔抗体 质控线或参考线 10.00 驴抗羊抗体 质控线或参考线 10.00 兔抗
我做的是大鼠肾脏 MMP-9 和 PAI-1 的免疫组化染色。MMP-9 为山羊抗鼠的,PAI-1 为兔抗鼠的,均为中山公司产品。选用中山公司相应的二抗试剂盒。反复做了好几批片子可结果总是不尽如人意,背景颜色比较深,难以判断阳性结果。 具体步骤如下: 1、石蜡包埋组织切片 4μm,用的是中山公司的多聚赖氨酸防脱片的玻片,捞片后置 60℃ 烤箱烤片 2-4 小时。 2、半月后,脱蜡水化 3、PBS 液冲洗,3 分钟×3; 4、切片置于 1%triton-x-100
1、主要试剂 (1)羊抗人C4抗血清 按说明书所示单扩效价扩大2-4倍稀释,或分别用含不同浓度抗体的琼脂糖凝胶浇板,选择峰高、清晰度适当的抗体浓度为最适工作浓度; (2)羊抗人B因子抗血清 按说明书所示单扩效价扩大3-5倍稀释,也可按选择C4抗血清稀释浓度的方法确定最适工作浓度; (3)电泳缓冲液 称取10.30g巴比妥钠,1.83g巴比妥,溶于1000mL蒸馏水中。此液为pH8.6,离子强度0.05的巴比妥缓冲液; (4)凝胶缓冲液 以定量测定时用1:4稀释的电泳缓冲液,B因子定量时
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