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- 上海研生
- YS-D4397
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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
45
- 英文名：
Goat anti-Equine IgG/FITC
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014)，使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液，混匀，充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50~100万细胞/管，然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后，10000~14000 rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片；
(2) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM；
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量，具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
(5) 充分裂解后，10000~14000rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
产品名称：羊抗马IgG–FITC说明书
英文名称: Goat anti-Equine IgG/FITC
储存条件: -20°C
单位: 瓶
其它:
备注：产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
参数规格：
| 产品名称 | 羊抗马IgG–FITC说明书 |
| 英文名称 | Goat anti-Equine IgG/FITC |
| 货号 | YS-D4397 |
注意事项：
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
下列是羊抗马IgG–FITC说明书的相关产品：
Homo sapiens (Human)山梨醇发酵管
3-酰苯酸AFP-L1 ELISA Kit
Rattus norvegicus (Rat)培养基
2,3-二酸UBE2I/UBC9/UBCE9 ELISA Kit
Mus musculus (Mouse)鼠李糖发酵管
2-氯-4,6-二基AAV ELISA Kit
Homo sapiens (Human)蔗糖发酵管
4-溴基-2-氯-酸频那醇酯ADA ELISA Kit
Rattus norvegicus (Rat)阿拉伯糖发酵管
苯酸-2-溴酯A
羊抗马IgG–FITC说明书视觉抑制蛋白抗体Visual Arrestin
血管内皮细胞生长因子受体3抗体VEGFR3
囊泡酰胆通道抗体VAT
含缬酪肽蛋白抗体VCP
等电压依赖性阴离子通道抗体VDAC
磷酸化血管内皮生长因子受体2抗体phospho-VEGFR2(Tyr951)
信号通路Wnt1抗体Wnt1
信号通路Wnt3a抗体Wnt3a
磷酸化WEE1蛋白抗体Phospho-Wee1(Ser53)
WDFY3蛋白抗体WDFY3
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文献和实验0.05%Tween –2%NGS,振荡，室温静置10min，加20 μl的羊抗小鼠–FITC荧光标记抗血清，稀释度1：100～1：300。孵育于37 ℃ 45 min，加1.25 ml PBS –Tween,室温静置10 min，离心，倾去上清液。 （6）生物素标记探针的荧光显示：加200 μl 4×SSC含0.1%Trion X-100 和5%BSA。室温静置10 min后，加20 μl抗生物素标记FITC抗血清15 μg/ml，孵育在37 ℃ 30 min，以1.5 ml 4×SSc –
/ml在PBS含5%奶粉或1%BSA，5μl/cm2）。在湿盒中，室温孵育20min。抗生物素-FITC在此应用是过量的，因此，可回收贮存4℃再次应用，其保存时间可达数周。反应见图20-4A直接法。 3）漂洗：PBs 2min×3，45℃。 4）如需放大（amplification）,即提高其敏感度，可按图20-4B间接法加生物素化羊抗抗生物素抗血清（biotinylated goat – antivaidin antibody）30min室温。倾去加另一层抗生物素-FITC
二抗在免疫学实验中起着举足轻重的作用，二抗的选择也决定了整个实验的成败。实验中在选择二抗时必须注意以下几点： （1）一抗种属来源 主要根据一抗种属来源来决定确定二抗的类型，如一抗是小鼠来源，那二抗就买抗小鼠的即可（如羊抗小鼠、兔抗小鼠等均可）。 （2）一抗类型 二抗需与一抗
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