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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
31
- 英文名:
Rabbit anti-Monkey IgG
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
瓶
1、本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。
参数规格:
| 产品名称 | 兔抗猴IgG(纯化)说明书 |
| 英文名称 | Rabbit anti-Monkey IgG |
| 货号 | YS-D4301 |
英文名称: Rabbit anti-Monkey IgG
储存条件: -20°C
纯度: >95%
外观(性状): 各种纯化抗体均为液体提供
单位: 瓶
其它:
采用硫酸铵盐析与DEAE-离子交换纤维素层析,或批次吸附纯化,制成高纯度(﹥95%)和高活性的纯化IgG抗体。各种纯化抗体均为液体提供,可根据用户要求,配成不同浓度,用前最好-20℃存放,可根据使用方法采用不同浓度稀释。通常不同使用目的可分别用下列缓冲液稀释,注意完全化冻,充分混匀。用前最好低温高速离心去除冷聚合球蛋白及变性蛋白后,重新定量。
金标记:用pH9.0硼酸缓冲液稀释,1~2mg/ml标记。
HRP标记:用0.01mol/LpH9.0、CB或用包被液CB稀释,6~8mg/ml标记
荧光标记:用0.5mol/LpH9.5、CB(碳酸盐缓冲液)稀释,10~20mg/ml标记。
生物素记抗体:用0.1mol/LNaHCO3稀释,1~2mg/ml标记。其它方法,如免疫扩散可用0.01mol/LpH7.2PBS稀释,ELISA包被10~20μg/ml4℃过夜或37℃2h。
使用方法:
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014),使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液,混匀,充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后,10000~14000 rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片;
(2) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1 mM;
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量,具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
(5) 充分裂解后,10000~14000rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
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文献和实验兔 抗胸腺细胞球蛋白(ATG) 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定兔血清,血浆及相关液体样本中抗胸腺细胞球蛋白(ATG)含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双 抗原 夹心法测定 标本 中 兔抗胸腺细胞球蛋白(ATG) 水平。用纯化的 抗原 包被微孔板,制成固相 抗原 ,往包被单抗的微孔中依次加入 抗胸腺细胞球蛋白(ATG) ,再与 HRP 标记的抗原结合
」进行分离。 每种层析技术各有优势和特点,「组团出道」才能到达最佳的纯化效果。希望通过这份密卷,能够加速大家的纯化之路,由凝胶过滤、标签蛋白纯化、抗体纯化、离子交换、层析空柱等内容构成。 绝招一:凝胶过滤预装柱堵了、超压的处理方式 可能原因:缓冲液或样品未进行过滤、蛋白沉淀或杂质残留、清洗不及时等引起层析柱滤膜堵塞;流速过快、流动相粘度(如乙醇等)过高、温度过低。 建议处理方法:首先卸柱子,确定是系统还是柱子堵了。如果是柱子堵了:参考说明书 CIP 操作进行清洁;更换层析柱顶端滤膜
一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白,辛酸为短链脂肪酸,在酸性条件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白质;第二步利用硫酸铵盐析将Ig沉淀下来,操作步骤如图3-10所示。经SDS-PAGE电泳检测能得到电泳纯度较高的Ig。三、仪器、原料和试剂1、仪器磁力搅拌器、离心机、低温冰柜。2、原料抗血清(兔抗鸡血清)。3、试剂(1) 乙酸-乙酸钠缓冲液:60mmol/L,pH
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