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- 上海研生
- YS-D4297
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- 2025年07月13日
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- 技术资料
- 库存：
27
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014)，使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液，混匀，充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50~100万细胞/管，然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后，10000~14000 rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片；
(2) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM；
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量，具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
(5) 充分裂解后，10000~14000rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
产品名称：人白蛋白-FITC说明书
储存条件: -20℃
单位: 支
其它:
备注：产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
参数规格：
| 产品名称 | 人白蛋白-FITC说明书 |
| 英文名称 | 详见说明书 |
| 货号 | YS-D4297 |
注意事项：
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
下列是人白蛋白-FITC说明书的相关产品：
神经细胞粘附分子1(抗原)
癌胚抗原相关细胞粘附分子8
CD68抗原
干细胞生长因子受体/细胞表面分化抗原（抗原）
造血干细胞抗原（多肽抗原）
CD147(抗原)
CD169抗原
B 和 T 淋巴细胞衰减蛋白(抗原)
周期素依赖激酶2(抗原)
周期素依赖性激酶4(抗原)
人白蛋白-FITC说明书磷酸化糖皮质激素调节激酶1抗体Phospho-SGK1 (Ser422)
分泌型卷曲相关蛋白1抗体SFRP1
精氨酸结合蛋白2抗体SORBS2
溶质载体锌转运3抗体SLC30A3
丝氨酸蛋白酶抑制剂13抗体SERPINB13
丝氨酸/苏氨酸激酶25抗体STK25
染色体特异性转录延伸因子抗体SUPT16H
阅读障碍相关蛋白Shootin抗体KIAA1598
外纺锤体极样蛋白1抗体Separase
溶质转运蛋白家族44成员1抗体SLC44A1
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文献和实验色为 FITC 和 PE 通道滤光片吸收的部分，其中浅黄色和浅绿色之间有一部分是重叠的，所以 FITC 染料发射出的光可以被 PE 光路通道吸收到（也就是红色框的部分），导致出现假阳性的结果。因此需要补偿调节，把 PE 通路吸收到的光消掉，去掉假阳性结果。 （图片来自于 abcam 公司） 问题二：如何进行调节补偿 流式细胞仪的荧光补偿设置过程大致相同，需要根据仪器说明书在检测过程中进行设置，也可以下机后利用
【求助】Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒的使用
mmsong1987 我买了Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒，想研究某种材料的细胞毒性，看其是否会诱导细胞凋亡。之前做过MTT之类的检测，结果显示材料基本无毒性。 由于条件限制（流式细胞仪在我们学校另一个校区）不能及时进行检测，前两天进行了一次实验，是将细胞收集后拿到测试地点再进行的荧光染色处理，检测结果显示阴性对照组没有加材料处理的细胞也多处于凋亡状态，个人猜测可能跟细胞在路上耽误的时间有关（悬浮在Annexin V结合液中
sunchangzheng 我打算用此抗体通过流式检测细胞表面P糖蛋白的表达量差异。 说明书中说是多抗，这种抗体有单抗的吧？ 用于FCM： 1：20-100，这是说用于流式的稀释倍数，是不是稀释倍数越小越好呢？ 同型对照抗体是不是必须要做的？如何选择阴型同型对照抗体呢！ 我用的抗体是FITC标记的P-糖蛋白抗体 谢谢交流与帮助！ freecell 抗体的稀释倍数是需要优化
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