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- 2025年07月08日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存：
57
- 英文名：
Anti-FEN1 Monoclonal Antibody
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
宿主: Mouse
英文名称: Anti-FEN1 Monoclonal Antibody
别名: FEN-1;MF1;RAD2;DNase IV;Flap endonuclease 1;flap structure endonuclease 1;hFEN 1;Maturation factor 1
应用: WB ICC
稀释比例: WB 1:1000. ICC 1:400.
蛋白分子量: 36/43kDa
Gene ID: 2237
保存: Store at -20°C. Avoid freeze / thaw cycles.
储存液: Buffer: PBS with 0.02% sodium azide, 50% glycerol, pH7.3.
纯化方法: Affinity purification
实验操作步骤：
Anti-FEN1 Monoclonal Antibody价格是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例，简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
方法/步骤
在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃，5% CO2 的条件下)。
向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
向每孔加入 10μl CCK8 溶液（engreen） (注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数)。
5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
细胞周期检测的原理：
PI法是经典的周期检测方法。PI为插入性核酸荧光染料，能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合，其结合的量与DNA的含量成正比例关系，用流式细胞仪进行分析，就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态，从而计算出各个期的百分含量。PI染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。
常用的细胞染色方法有:
1.简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;
2.革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或)脱色以及番红复染四个过程;
3.瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;
4.吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;
5.细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。
蛋白提取/定量
蛋白提取频道,提供蛋白提取实验用蛋白提取试剂盒，蛋白裂解液，蛋白浓度测定试剂盒等蛋白质实验用试剂及耗材。其中蛋白提取系列包括：植物蛋白提取试剂盒，细胞组织蛋白提取试剂盒，胞膜/细胞核蛋白提取试剂盒，全蛋白提取试剂盒等。
操作说明：
一，微孔酶标仪法
1. 完全溶解蛋白标准品，取10ml，加240ulPBS稀释至250ml ，使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀，取1ml 5×G250染色液，加入4ml双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3. 将标准品按0, 2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中，加PBS稀释液补足到20微升。
4. 将样品作适当稀释（zui好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液，室温放置3-5分钟。
6. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
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文献和实验指仅对一种抗原决定基的纯粹的抗体。这类抗体不可能通过将抗原 胞的 Hybridoma，在试管内制成了纯粹的单克隆抗体。用某种抗原使动物产生免疫感应，对应于抗原之不同部分可制成各种不同的抗体复合体。然而，因为一个产生抗体的细胞，只能产生一种抗体，所以骨髓肿瘤细胞与产生抗体细胞间的细胞杂种，可形成边产生抗体边增殖的 hybridoma，将每个杂种细胞进行克隆（无性繁殖系）培养，则一个克隆的细胞群只由单种类产生同一抗体的细胞所组成，这样得到的就是单克隆抗体。此抗体在测定
Monoclonal Antibody Production
Order 6 six week old Balb/C mice and let the ARC know they are coming.Have your antigen ready for when they arrive.Once they get there earmark the mice and perform a pre-bleed on them to be used as an ELISA control for monitoring the titer
a simple ELISA method to detect human anti-antibody response.
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