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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
36
- 英文名：
BSA/Biotin
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
实验操作步骤：
生物素-BSA说明书是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例，简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
方法/步骤
在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃，5% CO2 的条件下)。
向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
向每孔加入 10μl CCK8 溶液（engreen） (注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数)。
5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
细胞周期检测的原理：
PI法是经典的周期检测方法。PI为插入性核酸荧光染料，能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合，其结合的量与DNA的含量成正比例关系，用流式细胞仪进行分析，就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态，从而计算出各个期的百分含量。PI染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。
产品名称：生物素-BSA说明书
英文名称: BSA/Biotin
储存条件: -20℃
单位: 支
其它:
产品简介：公司公司研制的生物素化抗体是经亲和层析纯化成高纯度IgG成分，将进口的活化生物素（羟基琥珀酰亚胺酯，BNHS）共价交联到抗体IgG分子上制成。生物素化抗体标记的样品可应用酶标或荧光染料标记的亲和素或生物素-亲和素复合物来检测。本产品0.1ml含有0.25mgBSA。
工作效价：
ELISA法：1：1000～2000
组织化学：1：100～500
免疫印迹：1：100～200。
具体效价以产品标签为准，最佳使用条件需根据所检测样本的抗原及一抗效价优化而定。
备注：产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
公司供应的蛋白与免疫量大优惠大。
常用的细胞染色方法有:
1.简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;
2.革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或)脱色以及番红复染四个过程;
3.瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;
4.吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;
5.细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。
蛋白提取/定量
蛋白提取频道,提供蛋白提取实验用蛋白提取试剂盒，蛋白裂解液，蛋白浓度测定试剂盒等蛋白质实验用试剂及耗材。其中蛋白提取系列包括：植物蛋白提取试剂盒，细胞组织蛋白提取试剂盒，胞膜/细胞核蛋白提取试剂盒，全蛋白提取试剂盒等。
操作说明：
一，微孔酶标仪法
1. 完全溶解蛋白标准品，取10ml，加240ulPBS稀释至250ml ，使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀，取1ml 5×G250染色液，加入4ml双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3. 将标准品按0, 2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中，加PBS稀释液补足到20微升。
4. 将样品作适当稀释（zui好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液，室温放置3-5分钟。
6. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
以下是公司正在热销的产品：
RAN GTPase酶激活蛋白1抗体RanGAP1
减数分裂重组蛋白家族REC8抗体REC8
视黄醛脱氢酶2型抗体RALDH2
再生基因蛋白4抗体REG4
受体转运蛋白3抗体RTP3
G蛋白信号调节蛋白21抗体RGS21
再生基因蛋白4抗体REG4
受体相互作用蛋白激酶1抗体RIP1
RB1的诱导卷曲蛋白RB1CC1抗体RB1CC1
环指蛋白211抗体RNF211
生物素-BSA说明书乳酸脱氢酶抗原
瘦素受体
脂蛋白磷脂酶A2抗原
肠上皮干细胞蛋白（多肽）
促黄体生成素抗原
人促黄体生成素(多肽)
人促黄体生成素受体抗原
L-组氨酸脱羧酶抗原
白血病抑制因子抗原
白血病抑制因子受体抗原
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文献和实验γRⅢ/Ⅱ 结合，封闭非特异性染色，使阴性细胞的背景荧光降至未标记细胞的水平。加入 0.5-1 μg 纯的抗小鼠 CD16/32 单克隆抗体，室温孵育 10 分钟。 对于人和大鼠，可直接使用过量的，与荧光抗体相同来源和亚型的纯化 Ig 或者与目标种属相同来源的血清进行阻断，或者用商业化的 Fc 受体阻断剂。 五、细胞染色 按照说明书的推荐用量加入荧光标记抗体，混匀后置于 4℃，避光孵育 30 分钟。 加入细胞染色 buffer (或含 1%BSA 的 PBS)重悬细胞，300g 离心
过夜。在干燥器中储存室温试管，可保存数年。包被有20μl氯甘脲试管碘化效率低。如果抗体在正常碘化反应中受损，可以使用。 2.准备分离标记抗体的凝胶层分析柱，体的凝胶层分析柱。排阻限制为20000～50000凝胶介质用于分离球形蛋白分子。选择中等粒度的凝胶微柱(直径约100μm）。按说明书准备装备1ml标记后，体积凝胶微柱的滤柱将被丢弃，因此应选择合适的滤柱。为了最大限度地减少碘化蛋白的非特异性组合，滤纸应至少先使用10倍体积的含0.02％叠氮钠的1％BSA/PBS然后再用10倍体积的PBS去除淋洗滤柱
是不是做 Western 的时候，会遇到这样的情况呢？没错，就是背景很脏。造成背景脏的原因有很多，比如一抗没洗干净，或者二抗没洗干净，还有就是封闭的时候不完全。但其实，封闭液也是你们很容易忽略的一个环境哈。封闭液有几种？除了脱脂奶粉和 BSA 还有啥你们能想到的？第一种封闭液就是脱脂奶粉，这是异常便宜的封闭液品种，当然也应该是你们最常用的封闭液配方了。（甚至我们用过特仑苏）但是，你们应该注意到的是，脱脂奶粉中有大量的生物素，也就是说你做的蛋白要是用生物素标记的，一抗也是抗生物素的。那用脱脂
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