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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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52
- 适应物种:
人/植物/小鼠/大鼠/动物
目前,我公司的异柠檬酸脱氢酶1试剂盒采用的原理为:可见区的显色反应和紫外区的某一物质变化量。某物质与显色剂反应后,形成区别于自身的颜色反应,在某一波长下,吸光度的强弱与物质的含量呈正比关系。
其显色反应的示意图如下:
保证试剂盒测定温度一致的措施通常如下:
1. 优先选用带温控装置的仪器,如高档分光光度计或者酶标仪,可以直接设定需要的温度,但要注意预热。
2. 打开房间的空调,根据天气情况设定制冷或者加温,并且待室温稳定后再开始测定。
3. 提前一小时冰箱中取出试剂,放到室温中。还可以利用水浴锅保温反应体系中体积的试剂,通常是缓冲液。这样,即使不是指定测定温度,但是可以保证不同样品基本在几乎同样的温度下测定。
4. 如果当地温差变化大,一定要注意调整室温。
注意:异柠檬酸脱氢酶1试剂盒 待中保温的试剂应该先放到水浴锅中,然后加温到指定温度,这样可以保证试剂盒温度与水浴锅温度一致;或者待保温试剂要在已经达到指定温度的水浴锅中保温超过半小时以上。
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文献和实验异柠檬酸脱氢酶 isocitrate dehydrogenase
异柠檬酸脱氢酶 isocitrate dehydrogenase 有两种类型的酶:要求以 NAD为辅酶的酶( EC1. 1. 1. 41)和要 NADP的酶( EC1. 1. 1. 42),两者催化同一反应。 异柠檬酸 NAD( P) α -酮戊二酸 CO2 NAP( P) H H4 在三羧酸循环中正常起作用的是要求 NAD为辅酶的酶,此酶是为 ADP激活的变构酶。
异柠檬酸 isocitric acid柠檬酸的异构体,虽然量少,但广泛存在于生物界。在落地生根属( Bryophyllum)等多汁植物的叶、或悬钩子类中特别多,生物能够利用的是 D型。是三羧酸循环中的一个成分。柠檬酸在鸟头酸酶的作用下可逆地生成异柠檬酸和顺鸟头酸。在异柠檬酸脱氢酶( EC1. 1. 1. 41)的作用下变成 a-酮戊二酸,在异柠檬酸裂合酶( isocitrate lyase, EC4. 1. 3. 1)的作用下变成琥珀酸与乙醛
它的活性,AMP可对抗ATP的抑制而起激活作用。 (2)异柠檬酸形成 柠檬酸的叔醇基不易氧化,转变成异柠檬酸而使叔醇变成仲醇,就易于氧化,此反应由顺乌头酸酶催化,为一可逆反应。 (3)第一次氧化脱酸 在异柠檬酸脱氢酶作用下,异柠檬酸的仲醇氧化成羰基,生成草酰琥珀酸(oxalosuccinate)的中间产物,后者在同一酶表面,快速脱羧生成α-酮戊二酸(αketoglutarate)、NADH和CO2,此反应为β-氧化脱羧,此酶需要Mn2+作为激活
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