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- 详细信息
- 文献和实验
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21
- 英文名:
Goat anti-Human IgG/HRP
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
储存条件: -20°C
- 规格:
瓶
产品名称:羊抗人IgG-HRP
英文名称: Goat anti-Human IgG/HRP
储存条件: -20°C
酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。目前较为常用的是将辣根过氧化物酶(HRP),经过钠氧化而标记在抗体IgG分子上,而制成HRP—抗体结合物。公司向用户提供的各类酶标物,均根据本公司建立的改良过钠氧化法标记而成。每种成品已加入一定浓度的BSA作为稳定剂。产品的工作浓度根据方法不同而别,用前最好-20℃冻存,避免反复化冻。
应用范围:
抗原决定族的抗原性分析鉴定,各种抗原、抗体的定量、定性及定位分析测定等。
工作中易产生的问题:
1.包被抗体或抗原不适,易产生阳性值较小,或产生变异,即跳管现象。
2.用抗血清不纯化,或纯化程度太低的抗体包被,则阳性值较小,或没有阳性梯度。
3.封闭不好或标记物过浓可产生对照较高。
主要性能:
每支0.1ml液体,内含有HRP约200μg/支,IgG约含400μg/支,BSA300μg/支,-20℃保存,稳定一年。4℃保存约3~6个月,1:10稀释,4℃可30天左右。稀释液为:pH7.4PBST。
工作效价:
直接ELISA法:1:500~1:1000,用TMB作底物(OD450nm)P/N=2.5~3.0为阳性。
免疫印迹法:1:200~400,免疫组化:1:20~40,斑点免疫1:200~400。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
| 产品名称 | 羊抗人IgG-HRP |
| 英文名称 | Goat anti-Human IgG/HRP |
| 货号 | BH-DB1046 |
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL~1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
固定液的应用:
1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以pH7 2~7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1.单纯固定液
(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
(3)4%的多:主要用于培养细胞的固定。
2.混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效
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Jurk. Clone E6-1细胞,白血病细胞 急性T细胞白血病细胞,TALL-104细胞 人胰腺导管癌细胞;CFPAC-1D-焦谷氨酸(标准品)D-Pyroglutamic acid质量规格:HPLC法有关物质检查
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原代软骨细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml酰基呋塞米-β-D-葡萄糖苷酸Furosemide Acyl-β-D-glucuronide质量规格:美国进口
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小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体 英文名称: urokinase-plasmingen activator receptor 规格: 48T/96T 英文缩写: uPA-R Fluoronaphthalene 中文名: 分子式:C10H7F 度:98.0%
小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine 175291-56-2 中文名:Fmoc-苏氨酸磷酸苄酯 分子式:C26H26NO8P 度:98.0% 关键词:
小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(mouse uPA) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Miconazole nitrate 中文名:硝酸咪康唑 分子式:C18H15Cl4N3O4
羊抗人IgG-HRPMethyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 109837-85-6 中文名: 分子式:C19H34O3 度:% 关键词: 小鼠晚期糖基化终末产物elisa试剂盒 小鼠晚期糖基化终末产物试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠晚期糖基化终末产物试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠晚期糖基化终末产物试剂盒、小鼠晚期糖基化终末产物eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Methyl (3R)-3-(tert-butyldimethylsilyloxy)-5-oxo-6-triphenylphosphoranylidenehexanoate 147118-35-2 中文名: 分子式:C31H39O4PSi 度:98.0% 关键词: 小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体elisa试剂盒 小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体试剂盒、小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Methoxydienone 2322-77-2 中文名:沃氏物 分子式:C20H28O2 度:98.0% 关键词: 小鼠胰蛋白酶elisa试剂盒 小鼠胰蛋白酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠胰蛋白酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠胰蛋白酶试剂盒、小鼠胰蛋白酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Methenolone enanthate 303-42-4 中文名:美替诺龙庚酸酯 分子式:C27H42O3 度:98.0% 关键词: 小鼠支原体elisa试剂盒 小鼠支原体试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠支原体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠支原体试剂盒、小鼠支原体eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Methenolone acetate 434-05-9 中文名:美替诺龙醋酸酯 分子式:C22H32O3 度:98.0% 关键词: 小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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文献和实验底物范围较广,包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB,0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3% (W
问:有没有做辣根过氧化物标记的朋友啊,能不能把你们的步骤发给我。本人开始做,发现很多人用的浓度都不一样。答:1.1 试剂准备1) 10mg/mL HRP2) 0.06mol/L NaIO43) 0.16mol/L乙二醇4) 碳酸盐缓冲液(Na2CO3 0.7952g NaHCO3 1.4702g 溶于500mL蒸馏水中,调pH值到9.5)5) 2.5mg/mL NaBH46) 0.01mol/L磷酸盐缓冲液,pH7.41.2 操作步骤1. 10mg/mL取HRP VmL,溶液为棕黄色,加入
显色(HRP酶) 1.增强化学发光法(ECL) Ecl 显色原理:氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物,是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺(luminol,5'-氨基-2,3-二氢-1,4-酞嗪二酮)的分子结构及化学反应式如下: 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物,也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中,含有H2O2和鲁米诺,在HRP(辣根过氧化物酶)的作用下,发出荧光来。 试验步骤: 1)将两种显色底物1:1等体积混合(一般各1ml/membrane)。
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