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- 2025年07月14日
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- 详细信息
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43
- 英文名：
HumanTACE/ADAM17
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详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
| 产品名称 | 人解整合素样金属蛋白酶17酶联免疫检测试剂盒 |
| 英文名称 | HumanTACE/ADAM17 |
| 货号 | BH-DB868 |
英文名称:HumanTACE/ADAM17
反应性:Human
样品类型:血清/血浆/细胞培养上清
检测范围:156-10，000pg/ml
灵敏度:70pg/ml
注意事项：
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
免疫球蛋白：
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操作步骤：
根据使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用（PMSF 现用现加）。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品： 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
温馨提示：
工作液与浓缩液选择的技巧，以及各自的优势。
1，工作液的优势：工作液操作方便，降低实验操作步骤，对于要求无菌的实验，降低染菌风险。
2，浓缩液的优势：浓缩液成本相对较低，实验范围更广，对于不要求无菌的实验，可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高，保存更加稳定。
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文献和实验常用蛋白酶抑制剂 抑制剂靶蛋白酶有效浓度储藏溶液注解Antipain木瓜酶和胰酶50μg/ml1mg/ml水溶液对胰凝蛋白酶，胃液素，纤溶酶无影响APMSF胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶10-40μg/ml或10-20μM100mmol/L水溶液毒性比PMSF低，不能抑制胰凝蛋白酶或乙酰胆碱酯酶抑肽酶丝氨酸蛋白酶0.06-2μg/ml10mg/mlPBS溶液避免反复动冻融抑氨肽酶B氨基肽酶40μg/ml溶于甲醇不能抑制羧肽酶Calpain抑制剂Ⅰ、ⅡCalpain (钙依赖性半胱氨酸蛋白酶)Ⅰ:17
、MMP-11、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3。人成骨肉瘤MG-63细胞株可表达MMP-12，hOB则无。结论：人成骨肉瘤MG-63细胞株和hOB表达的MMPs和TIMPs类型基本相似，人成骨肉瘤MG-63细胞株可以作为具有人成骨细胞表型特征的成骨细胞模型来研究MMPs和TIMPs的表达与调控。三、雌二醇对人成骨肉瘤MG-63细胞株和成人成骨细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子的作用目的：探讨雌二醇（17β-estradiol，E2）对人成骨
的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。 常用抑制剂 PMSF 1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶，凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶); 2)10mg/ml溶于异丙醇中; 3)在室温下可保存一年; 4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L); 5)在水液体溶液中不稳定，必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。 EDTA 1)抑制金属
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