单组分TMB显色液规格

注意事项：
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。

参数规格：

产品名称	单组分TMB显色液规格
英文名称	TMB Single-Component Substrate solution
货号	YS-D3250

产品名称：单组分TMB显色液规格
英文名称:TMB Single-Component Substrate solution
储存条件:2-8℃，避光，有效期:3年
单位:瓶
产品简介:
目前酶免疫分析（EIA)技术，已被广泛应用:于抗原，半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶（HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶，由于3,3',5,5'-四甲基联（TMB)在HRP的显色反应体系中，比其它色原具有更高的灵敏度:且无致癌性而被广泛应用:。TMB主要应用:于酶联免疫吸附实验（ELISA)，免疫斑点杂交或者免疫组化以及氯和过氧化氢的检测分析。为了满足不同的试剂盒产品与以及科研需求，本公司专门研制了针对不同类型的基于HRP的免疫分析用TMB显色液。
产品特点：
即用型：无需混合，方便快捷，减少误差
灵敏度:高：不低于A、B液
稳定性好：2-8℃保存，有效期:不低于36个月；显色终止后读数稳定
背景低：底物溶液在650nm检测时检测OD值小于0.04
质量可靠：产品批间差异小
外观：本试剂一般情况下为无色，有时略显浅蓝色或浅黄色
使用方法：
用适当的干净容器（用纯净水反复冲洗），倒出适量的单组分TMB显色液，待达到室温后即可使用。
加液：加完HRP结合物并孵育一定时间后，用适当洗涤液洗板3-5次，每孔加TMB显色液100ul。 根据个人实验需要，在室温（15-25℃）或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间，直至显色至预期深浅。
终止：加入等体积的1M 盐酸或硫酸溶液终止反应，孔中反应液由蓝色变为黄色。
读数：终止反应后30分钟内在450nm处测定吸光值。
注意：如果出现高的反应背景或沉淀，表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀，可在终止后马上读数；或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。
使用方法：
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014)，使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液，混匀，充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50~100万细胞/管，然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后，10000~14000 rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片；
(2) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM；
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量，具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
(5) 充分裂解后，10000~14000rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
下列是单组分TMB显色液规格的相关产品：
YM201636 质量>98%,PIKfyve抑制 YM201636
异鼠李-3-O-新橙皮糖苷英文名称Isorhamnetin-3-O-neohesperidoside规格:20mg/支
 MV3(人黑色瘤细胞)无花曲 Aspergillus ficuum
异水飞蓟宾英文名称Isosilybin (A+B) mixture规格:20mg/支
金丝桃苷() 质量HPLC≥98%， Hyperoside
异香兰英文名称Isovanillin规格:20mg/支
单组分TMB显色液规格142998478AluI600 units猪去酰化饥饿激素(dGHRL)鸡神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA Kit，48T/96T
GAB4FHL2大鼠水解酶(AGMAT)大鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA Kit，48T/96T
GAB3FNIP1大鼠巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA Kit，48T/96T
GAAFUT8大鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)人17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA Kit，48T/96T
G6PC3FAM13B1大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC1)鸡17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA Kit，48T/96T
GADL1FOLR2大鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP2)大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA Kit，48T/96T
GAD65 + GAD67Factor VIII大鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α/CCL20)小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA Kit，48T/96T
GABPB2FAM107A大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP3β/ELC/CCL19)人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA Kit，48T/96T
GABPAFAM104B大鼠巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP1α/CCL3)兔子白介素1可溶性受体I (IL-1sR Ⅰ)ELISA Kit，48T/96T
抗滋养膜细胞大鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA Kit，48T/96T