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33
- 英文名:
5×G250(Protein quantitative analysis)
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自订购之日起九个月内有效
- 供应商:
上海研生
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详见说明书
- 规格:
瓶
产品名称:5×考马斯亮蓝G- 250(蛋白定量用)价格
英文名称:5×G250(Protein quantitative analysis)
储存条件:自订购之日起九个月内有效
单位:ml
产品简介:
考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(Imax),由465nm变为595nm,在一定的浓度范围内,测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM,但受略高浓度的去垢剂影响,需确保SDS的浓度低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒。
实验操作步骤:
5×考马斯亮蓝G- 250(蛋白定量用)价格是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
方法/步骤
在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% CO2 的条件下)。
向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
向每孔加入 10μl CCK8 溶液(engreen) (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 OD 值的读数)。
5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
细胞周期检测的原理:
PI法是经典的周期检测方法。PI为插入性核酸荧光染料,能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合,其结合的量与DNA的含量成正比例关系,用流式细胞仪进行分析,就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态,从而计算出各个期的百分含量。PI染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。
常用的细胞染色方法有:
1.简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;
2.革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或)脱色以及番红复染四个过程;
3.瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;
4.吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;
5.细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。
蛋白提取/定量
蛋白提取频道,提供蛋白提取实验用蛋白提取试剂盒,蛋白裂解液,蛋白浓度测定试剂盒等蛋白质实验用试剂及耗材。其中蛋白提取系列包括:植物蛋白提取试剂盒,细胞组织蛋白提取试剂盒,胞膜/细胞核蛋白提取试剂盒,全蛋白提取试剂盒等。
操作说明:
一,微孔酶标仪法
1. 完全溶解蛋白标准品,取10ml,加240ulPBS稀释至250ml ,使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取1ml 5×G250染色液,加入4ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3. 将标准品按0, 2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加PBS稀释液补足到20微升。
4. 将样品作适当稀释(zui好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液,室温放置3-5分钟。
6. 用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
以下是公司正在热销的产品:
电泳级,PH5.59.598%12mlLTB4CLIA Kit for Annexin A2 (ANXA2)
电泳级,PH5.07.098%12mlIL2RCLIA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor (AhR)
电泳级,PH4.06.096%12mlIL21CLIA Kit for Parathyroid Hormone (PTH)
电泳级,PH3.510≥95%15mlIL1αCLIA Kit for RAB5A, Member RAS Oncogene Family (RAB5A)
颗粒酶A检测试剂盒5mgCLIA Kit for Choline Acetyltransferase (ChAT)
5612210X Buffer Eco52I1 ml猪转化生长因子β1(TGFβ1)CLIA Kit for Tyrosine Hydroxylase (TH)
470826Dilution Buffer for Restriction Enzymes5x1 ml猪转录因子AP1 CLIA Kit for Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a)
5131708910X Taq Buffer with KCl and 15 mM MgCl24x1.25 ml猪转铁蛋白(TF)CLIA Kit for Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a)
65995633Bovine Serum Albumin5 mg猪转铁蛋白受体(TFR)CLIA Kit for Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a)
11590922310X Buffer Bsp143I1 ml猪组(HIS)CLIA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2L3 (UBE2L3)
5×考马斯亮蓝G- 250(蛋白定量用)价格 酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人骨髓间充质干细胞(hMSCs)
水飞蓟亭英文名称Silychristin规格:20mg/支
黄芪皂苷III() 质量HPLC≥98%, Astragaloside III
水杨苷英文名称Salicin规格:20mg/支
平菇 Pleurotus sp.异常汉逊酵母 Hansenula anomala
斯皮诺英文名称Spinosin规格:20mg/支
英文名称:5×G250(Protein quantitative analysis)
储存条件:自订购之日起九个月内有效
单位:ml
产品简介:
考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(Imax),由465nm变为595nm,在一定的浓度范围内,测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM,但受略高浓度的去垢剂影响,需确保SDS的浓度低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒。
实验操作步骤:
5×考马斯亮蓝G- 250(蛋白定量用)价格是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
方法/步骤
在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% CO2 的条件下)。
向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
向每孔加入 10μl CCK8 溶液(engreen) (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 OD 值的读数)。
5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
细胞周期检测的原理:
PI法是经典的周期检测方法。PI为插入性核酸荧光染料,能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合,其结合的量与DNA的含量成正比例关系,用流式细胞仪进行分析,就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态,从而计算出各个期的百分含量。PI染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。
常用的细胞染色方法有:
1.简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;
2.革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或)脱色以及番红复染四个过程;
3.瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;
4.吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;
5.细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。
蛋白提取/定量
蛋白提取频道,提供蛋白提取实验用蛋白提取试剂盒,蛋白裂解液,蛋白浓度测定试剂盒等蛋白质实验用试剂及耗材。其中蛋白提取系列包括:植物蛋白提取试剂盒,细胞组织蛋白提取试剂盒,胞膜/细胞核蛋白提取试剂盒,全蛋白提取试剂盒等。
操作说明:
一,微孔酶标仪法
1. 完全溶解蛋白标准品,取10ml,加240ulPBS稀释至250ml ,使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取1ml 5×G250染色液,加入4ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3. 将标准品按0, 2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加PBS稀释液补足到20微升。
4. 将样品作适当稀释(zui好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液,室温放置3-5分钟。
6. 用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
以下是公司正在热销的产品:
电泳级,PH5.59.598%12mlLTB4CLIA Kit for Annexin A2 (ANXA2)
电泳级,PH5.07.098%12mlIL2RCLIA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor (AhR)
电泳级,PH4.06.096%12mlIL21CLIA Kit for Parathyroid Hormone (PTH)
电泳级,PH3.510≥95%15mlIL1αCLIA Kit for RAB5A, Member RAS Oncogene Family (RAB5A)
颗粒酶A检测试剂盒5mgCLIA Kit for Choline Acetyltransferase (ChAT)
5612210X Buffer Eco52I1 ml猪转化生长因子β1(TGFβ1)CLIA Kit for Tyrosine Hydroxylase (TH)
470826Dilution Buffer for Restriction Enzymes5x1 ml猪转录因子AP1 CLIA Kit for Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a)
5131708910X Taq Buffer with KCl and 15 mM MgCl24x1.25 ml猪转铁蛋白(TF)CLIA Kit for Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a)
65995633Bovine Serum Albumin5 mg猪转铁蛋白受体(TFR)CLIA Kit for Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a)
11590922310X Buffer Bsp143I1 ml猪组(HIS)CLIA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2L3 (UBE2L3)
5×考马斯亮蓝G- 250(蛋白定量用)价格 酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人骨髓间充质干细胞(hMSCs)
水飞蓟亭英文名称Silychristin规格:20mg/支
黄芪皂苷III() 质量HPLC≥98%, Astragaloside III
水杨苷英文名称Salicin规格:20mg/支
平菇 Pleurotus sp.异常汉逊酵母 Hansenula anomala
斯皮诺英文名称Spinosin规格:20mg/支
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