全蛋白提取试剂盒(强)图片

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  • 上海研生
  • YS-D3223
  • 进口、国产
  • 2025年07月14日
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      详见说明书

    • 供应商

      上海研生

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

    公司供应的蛋白与免疫量大优惠大。
    全蛋白提取试剂盒(强)图片
    产品名称:全蛋白提取试剂盒(强)图片
    储存条件:-20℃,避光,有效期:至少1年

    单位:盒
    全蛋白提取试剂盒(强)用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,作用较为强烈,可快速获得总蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品仅用于科研。
    操作方法:
    1、组织总蛋白的提取
    1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF;混匀,放置在冰上备用;
    称取0.1g的新鲜组织,放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处,用眼科剪将组织块尽可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直至没有明显的组织块,这个过程注意冰上操作;
    将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g离心30min;
    吸取上清至新的管中;
    进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
    (提取好的蛋白建议保存于-80 oC,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
    2、细胞总蛋白的提取
    裂解液的用量:107个细胞需要裂解液1ml;
    贴壁细胞:弃去培养基,用冷的PBS洗两次,弃去PBS,然后加入计算好的细胞裂解液;在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞,
    将刮离的细胞裂解液移入EP管中,颠倒裂解20-30min
    悬浮细胞:4 oC 400g离心收集细胞,用冷的PBS洗两次细胞,同样按细胞数加入裂解液,
    涡旋10s,放置冰上裂解10min,重复3-4次;
    裂解完毕之后,将细胞裂解液4 oC 12000g离心30min;
    将上清移入新的EP管中;
    进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
    (提取好的蛋白建议保存于-80 oC,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
    全蛋白提取试剂盒(强)图片
    实验操作步骤:
    全蛋白提取试剂盒(强)图片是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
    方法/步骤
    96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% CO2 的条件下)。
    向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
    将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
    向每孔加入 10μl CCK8 溶液(engreen) (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 OD 值的读数)。
    5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
    用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
    如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
    细胞周期检测的原理:
    PI法是经典的周期检测方法。PI为插入性核酸荧光染料,能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合,其结合的量与DNA的含量成正比例关系,用流式细胞仪进行分析,就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态,从而计算出各个期的百分含量。PI染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。
    常用的细胞染色方法有:
    1.简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;
    2.革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或)脱色以及番红复染四个过程;
    3.瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;
    4.吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;
    5.细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。
    蛋白提取/定量
    蛋白提取频道,提供蛋白提取实验用蛋白提取试剂盒,蛋白裂解液,蛋白浓度测定试剂盒等蛋白质实验用试剂及耗材。其中蛋白提取系列包括:植物蛋白提取试剂盒,细胞组织蛋白提取试剂盒,胞膜/细胞核蛋白提取试剂盒,全蛋白提取试剂盒等。
    操作说明:
    一,微孔酶标仪法
    1.        完全溶解蛋白标准品,取10ml,加240ulPBS稀释至250ml ,使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
    2.        5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取1ml  5×G250染色液,加入4ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
    3.        将标准品按0, 2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加PBS稀释液补足到20微升。
    4.        将样品作适当稀释(zui好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
    5.        各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液,室温放置3-5分钟。
    6.        用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
    7.        根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
    以下是公司正在热销的产品:
    颗粒酶B检测试剂盒5mgCLIA Kit for WNT1 Inducible Signaling Pathway Protein 1 (WISP1)

    CLIA Kit for WNT1 Inducible Signaling Pathway Protein 2 (WISP2)
    CLIA Kit for Xanthine Dehydrogenase (XDH)
    CLIA Kit for Xanthine Dehydrogenase (XDH)
    PhosphoHER3(Tyr1328)髓鞘性蛋白(多肽抗原)CLIA Kit for Xanthine Dehydrogenase (XDH)
    HOMER3腺苷酸环化酶激活肽 138(全蛋白)CLIA Kit for X-Linked Inhibitor Of Apoptosis Protein (XIAP)
    H3K4HMTase SETD7粘附多肽GRGDSCLIA Kit for X-Box Binding Protein 1 (XBP1)
    HES1内皮素1(蛋白多肽 活性蛋白)CLIA Kit for X-Box Binding Protein 1 (XBP1)
    BR98%100gPOMCCLIA Kit for Xeroderma Pigmentosum, Complementation Group G (XPG)
    生物技术级,99.5%98%25gALADCLIA Kit for Xeroderma Pigmentosum, Complementation Group C (XPC)
    全蛋白提取试剂盒(强)图片CC16环指蛋白131抗体

    鼠尾草酸英文名称Carnosic acid规格:20mg/支
    CD22磷脂酶A2激活蛋白抗体
    薯蓣皂苷纤维二糖苷英文名称Diosgenyl-3-di-β-O-glucopyranoside规格:20mg/支
    Cathepsin G胸苷磷酸化酶抗体
    薯蓣皂
     

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