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42
- 英文名：
TMB Single-Component Substrate solution
- 保质期：
有效期:3年
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
2-8℃，避光，
- 规格：
瓶
产品名称：单组分TMB显色液
英文名称:TMB Single-Component Substrate solution
储存条件:2-8℃，避光，有效期:3年
单位:瓶
产品简介:
目前酶免疫分析（EIA)技术，已被广泛应用:于抗原，半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶（HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶，由于3,3',5,5'-四甲基联（TMB)在HRP的显色反应体系中，比其它色原具有更高的灵敏度:且无致癌性而被广泛应用:。TMB主要应用:于酶联免疫吸附实验（ELISA)，免疫斑点杂交或者免疫组化以及氯和过氧化氢的检测分析。为了满足不同的试剂盒产品与以及科研需求，本公司专门研制了针对不同类型的基于HRP的免疫分析用TMB显色液。
产品特点：
即用型：无需混合，方便快捷，减少误差
灵敏度:高：不低于A、B液
稳定性好：2-8℃保存，有效期:不低于36个月；显色终止后读数稳定
背景低：底物溶液在650nm检测时检测OD值小于0.04
质量可靠：产品批间差异小
外观：本试剂一般情况下为无色，有时略显浅蓝色或浅黄色
使用方法：
用适当的干净容器（用纯净水反复冲洗），倒出适量的单组分TMB显色液，待达到室温后即可使用。
加液：加完HRP结合物并孵育一定时间后，用适当洗涤液洗板3-5次，每孔加TMB显色液100ul。 根据个人实验需要，在室温（15-25℃）或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间，直至显色至预期深浅。
终止：加入等体积的1M 盐酸或硫酸溶液终止反应，孔中反应液由蓝色变为黄色。
读数：终止反应后30分钟内在450nm处测定吸光值。
注意：如果出现高的反应背景或沉淀，表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀，可在终止后马上读数；或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。
产品参数：
免疫球蛋白：
注意事项：
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
操作步骤 ：
根据使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用（PMSF 现用现加）。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品： 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
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单组分TMB显色液RatMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA试剂盒大鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒规格：96T/48T 桉脂素 HPLC≥98% 5mg
小鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒 ，英文名： ANG-1 ELISA Kit 奥多诺甙 H HPLC≥98% 5mg
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10倍酵母菌SD-HIS培养基100毫升 白桑八醇 HPLC≥98% 5mg
MousecoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISA试剂盒小鼠凝血因子Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)ELISA试剂盒规格：96T/48T 半齿泽兰素色烯 HPLC≥98% 5mg
小鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 半翅盐肤木内酯 HPLC≥98% 5mg
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温馨提示：
工作液与浓缩液选择的技巧，以及各自的优势。
1，工作液的优势：工作液操作方便，降低实验操作步骤，对于要求无菌的实验，降低染菌风险。
2，浓缩液的优势：浓缩液成本相对较低，实验范围更广，对于不要求无菌的实验，可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高，保存更加稳定。
英文名称:TMB Single-Component Substrate solution
储存条件:2-8℃，避光，有效期:3年
单位:瓶
产品简介:
目前酶免疫分析（EIA)技术，已被广泛应用:于抗原，半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶（HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶，由于3,3',5,5'-四甲基联（TMB)在HRP的显色反应体系中，比其它色原具有更高的灵敏度:且无致癌性而被广泛应用:。TMB主要应用:于酶联免疫吸附实验（ELISA)，免疫斑点杂交或者免疫组化以及氯和过氧化氢的检测分析。为了满足不同的试剂盒产品与以及科研需求，本公司专门研制了针对不同类型的基于HRP的免疫分析用TMB显色液。
产品特点：
即用型：无需混合，方便快捷，减少误差
灵敏度:高：不低于A、B液
稳定性好：2-8℃保存，有效期:不低于36个月；显色终止后读数稳定
背景低：底物溶液在650nm检测时检测OD值小于0.04
质量可靠：产品批间差异小
外观：本试剂一般情况下为无色，有时略显浅蓝色或浅黄色
使用方法：
用适当的干净容器（用纯净水反复冲洗），倒出适量的单组分TMB显色液，待达到室温后即可使用。
加液：加完HRP结合物并孵育一定时间后，用适当洗涤液洗板3-5次，每孔加TMB显色液100ul。 根据个人实验需要，在室温（15-25℃）或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间，直至显色至预期深浅。
终止：加入等体积的1M 盐酸或硫酸溶液终止反应，孔中反应液由蓝色变为黄色。
读数：终止反应后30分钟内在450nm处测定吸光值。
注意：如果出现高的反应背景或沉淀，表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀，可在终止后马上读数；或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。
产品参数：
| 产品名称 | 单组分TMB显色液 |
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| 货号 | BH-DB027 |
注意事项：
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
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c)对于组织样品： 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
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1，工作液的优势：工作液操作方便，降低实验操作步骤，对于要求无菌的实验，降低染菌风险。
2，浓缩液的优势：浓缩液成本相对较低，实验范围更广，对于不要求无菌的实验，可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高，保存更加稳定。
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20mg 二甲基甲酰胺（DMF） 2.5ml 0.05mol/L醋酸缓冲液（pH5.5） 50ml 30%H2O2 25ml 配制方法：先将AEC溶于DMF中，再加入醋酸缓冲液充分混匀。临显色前，加入30%H2O2。切片显色时间为5~20min。 该显色液作用后，阳性部分呈深红色，加以苏木精或亮绿等作为背景染色，则效果更佳。由于终产物溶于酒精和水，故需用甘油封固。 4、TMB显色液 试剂：TMB HCl
相关专题ABC和TMB显色液已稀释好的ABC和TMB显色液在加入酶标板孔前都应预先在37℃中平衡至少30分钟。试剂或样品稀释时，切不可忘记混匀。每次检测都应该做标准曲线。用户须估计样品待测因子的含量，决定适当的稀释倍数。1. 确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目，并增加1孔作为TMB空白显色孔。总数=样品数+9；做双份检测时×2。其余重包装好放如冰箱中。2. 将1000pg/ml ，500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.3pg/ml，15.6pg
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