4×Hifair® V nCov II 多重定量PCR反应RT-qPCR试剂盒

4×Hifair® V nCov II 多重定量PCR反应R

T-qPCR试剂盒
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  • 翌圣生物(Yeasen)已认证
  • 13118ES60
  • 上海
  • 2025年10月15日
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      4×Hifair® V nCov II Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

    • 保质期

      有效期1年

    • 供应商

      翌圣生物科技(上海)股份有限公司

    • 保存条件

      冰袋运输。-20℃保存,推荐分装冻存,避免反复冻融。

    • 规格

      100T

    产品信息
    产品名称 产品编号 规格 价格(元)
    4×Hifair® V nCov II Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit 13118ES60 100 T 3062.00
    4×Hifair® V nCov II Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit 13118ES80 1000 T 24062.00
    4×Hifair® V nCov II Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit 13118ES92 10000 T 185762.00

    产品描述
    4×Hifair® V nCov II Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量PCR在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。
    本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA,并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP BufferEnzymes Mix等,缓冲液中已含有Mg2+dNTP等,并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子,能够保证引物扩增效率的同时,进行多达四重的反应。
    4×Hifair® V nCov II 多重定量PCR反应R
    产品组分
    组分编号 组分名称 产品编号/规格
    13118ES60 (100 T) 13118ES80 (1000 T) 13118ES92 (10000 T)
    13118-A 4×Hifair® V MP Buffer 600 μL 6 mL 60 mL
    13118-B Hifair® V Enzyme Mix 100 μL 1 mL 10 mL
    13118-C RNase Free H2O 1.2 mL 12 mL 120 mL
    【注】a) 4×Hifair® V MP BufferMultiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的简写。
    b) 不含Rox reference dye。如需,推荐使用货号10200ES产品。
    c) Hifair® V Enzyme Mix主要包含Hifair® V Reverse TranscriptaseRNase inhibitorUNICON® HotStart Taq DNA Polymerase

    适用机型
    ABI系列:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus; 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;
    Bio-Rad系列:Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
    Roche系列:Roche Applied Science LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
    其他系列:Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;
    Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
    Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
    Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler; Illumina Eco qPCR.

    运输与保存方式
    冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。本品避免反复冻融。建议分装保存。

    注意事项
    1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
    2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
     

    反应体系(以25 μL体系为例说明)
    组分 体积(μL
    4×Hifair® V MP Buffer 6
    Hifair® V Enzyme Mix 1
    Primer/Probe Mix (10 μM) 1
    模板RNA 1 - 14
    RNase Free H2O To 25
    】:使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。
    a) 引物和探针浓度:Primer/Probe Mix中包含多对引物和探针,通常每条引物终浓度为0.4 μM,也可以根据情况在0.1-1.0 μM间进行调整;每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。
    b) 模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在在20-35之间适宜。
    c) 反应体系:推荐使用25 μL50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
    d) 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。

    标准扩增程序
      反应阶段 温度 时间 循环数
    1 逆转录 50℃a 10 min 1
    2 预变性 95℃ 5 min 1
    3 扩增反应 95℃ 15 sec 45
    60℃b 30 secc
    【注】                                                                                            
    a) 逆转录:42℃或者50℃均可,时间10-15 min
    b) 扩增反应扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。CDC 官方推荐的 ORF1ab N引物,退火温度建议≥60℃
    c) 荧光信号采集:不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据最短时间限制进行设置。

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    HB200407
     

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