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- 详细信息
- 文献和实验
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32
- 英文名:
Protein standard solution (5mg/ml BSA)
- 保质期:
有效期1年
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
储存条件:-20℃,
- 规格:
瓶
别名:牛血清白蛋白
英文名称:Protein standard solution (5mg/ml BSA)
储存条件:-20℃,有效期:1年
单位:ml
| 产品名称 | BSA标准品5mg/ml |
| 英文名称 | Protein standard solution (5mg/ml BSA) |
| 货号 | BH-DB017 |
牛血清白蛋白,英文名称:为Bovine Serum Albumin,也称Bovine albumin,或Cohn Fraction V,简称BSA。BSA有着极其广泛的实验室应用:,在免疫实验中常用作封闭剂,包括ELISA、WB(Western Blot)。作为载体蛋白,将其交联于半抗原和其他弱抗原可以使它们在抗体中具有更强的免疫原性。在限制性内切酶消化反应中,BSA常常被用作一些酶的反应稳定剂,并且能防止它粘附到管壁和枪头上。BSA也常用于生物制药的过程或者作为营养物用于细胞和微生物培养。除此之外,还作为蛋白定量检测的标准品使用。我们提供的BSA产品,使用优质牛血浆,利用热休克法(Heat Shock)法制备而成。
操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL~1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
以下是BSA标准品5mg/ml的相关产品:
ADCK2蛋白抗体 Anti-ADCK2 WB IHC-P
脱氢酶16家庭A1抗体 Anti-ALDH16A1 WB IHC-P
粘附分子IgG样结构域蛋白3抗体 Anti-AMIGO3 WB IHC-P
乙醇脱氢酶1抗体 Anti-AKR1A1 WB IHC-P
δ氨基乙酰脱水酶抗体 Anti-ALAD WB IHC-P
磷酸化RNA聚合酶相关蛋白LEO1抗体 Anti-phospho-LEO1 WB IHC-P
肿瘤抑制基因LATS2抗体 Anti-LATS2 WB IHC-P
磷酸化白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体 Anti-phospho-LSP1 WB IHC-P
磷酸化肿瘤抑制基因LATS2抗体 Anti-phospho-LATS2 WB IHC-P
白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体 Anti-LSP1 WB IHC-P
五味子乙素(标准品) Schizandrin B 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠己糖激酶1(HK1)ELISA试剂盒 ,英文名: HK1 ELISA Kit
五味子酯甲(标准品) Schisantherin A 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠甲基CpG结合蛋白2(MECP2)ELISA试剂盒 ,英文名: MECP2 ELISA Kit
西贝母碱(标准品) Sipeimine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA检测试剂盒MouseMethylaseELISAKit 96T/48T
西红花苷,α-藏花素(标准品) Crocin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA试剂盒 ,英文名: Methylase ELISA Kit
西红花苷I(标准品) Crocin I 质量规格:HPLC≥97%,标准品 小鼠甲胎蛋白(αFP)ELISA试剂盒 ,英文名: αFP ELISA Kit
西红花苷II(标准品) Crocin II 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠甲腺原酸脱酶Ⅱ(DIO2)ELISA试剂盒 ,英文名: DIO2 ELISA Kit
细叶远志皂苷(标准品) Tenuifolin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠甲腺原酸脱酶Ⅲ(DIO3)ELISA试剂盒 ,英文名: DIO3 ELISA Kit
仙鹤草酚B(标准品) Agrimol B 质量规格:TLC鉴别用 小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
血根碱(标准品) Sanguinarine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒 ,英文名: AFP ELISA Kit
香草酸(标准品) Vanillic acid 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠甲状旁腺激素(PTH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠几丁质酶1(CHIT1)ELISA试剂盒 ,英文名: CHIT1 ELISA Kit 五味子醇甲(标准品) Schisandrol A 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠己糖激酶(HK)ELISA检测试剂盒MouseHexokinase,HK 96T/48T 五味子醇乙(标准品) Schisandrol B 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠己糖激酶(HK)ELISA试剂盒 ,英文名: HK ELISA Kit 五味子甲素(标准品) Schizandrin A 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠己糖激酶1(HK1)ELISA试剂盒 ,英文名: HK1 ELISA Kit 五味子乙素(标准品) Schizandrin B 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠甲基CpG结合蛋白2(MECP2)ELISA试剂盒 ,英文名: MECP2 ELISA Kit 五味子酯甲(标准品) Schisantherin A 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA检测试剂盒MouseMethylase 96T/48T 西贝母碱(标准品) Sipeimine 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA试剂盒 ,英文名: Methylase ELISA Kit 西红花苷,α-藏花素(标准品) Crocin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠甲胎蛋白(αFP)ELISA试剂盒 ,英文名: αFP ELISA Kit 西红花苷I(标准品) Crocin I 质量规格:HPLC≥97%,标准品
小鼠甲腺原酸脱酶Ⅱ(DIO2)ELISA试剂盒 ,英文名: DIO2 ELISA Kit 西红花苷II(标准品) Crocin II 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠甲腺原酸脱酶Ⅲ(DIO3)ELISA试剂盒 ,英文名: DIO3 ELISA Kit 细叶远志皂苷(标准品) Tenuifolin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
BSA标准品5mg/ml兔子脑素/脑尿肽(BNP)ELISA检测试剂盒rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 96T/48T D绵子糖 HPLC≥98% 20mg
犬α1微球蛋白(α1-MG)试剂盒 Canine α1-microglobulin,α1-MG ELISA Kit 诺氟沙星 HPLC≥98% 100mg
英文名称HumanNeuroophin-4,-4ELISAkit人神经营养因子-4(-4)规格:96T/48T 瑞替加滨 HPLC≥98% 20mg
单酸甘油脂脂解酶(monoacylglycerollipase)活性比色法定量检测试剂盒20 盐酸沙拉沙星 HPLC≥98% 20mg
Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA试剂盒大鼠巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒规格:96T/48T 低聚果糖 HPLC≥95% 500mg
小鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒 ,英文名: BK ELISA Kit 瑞格列奈 HPLC≥99% 100mg
小鼠戊糖素(Peosidine)ELISA检测试剂盒MousePeosidineELISAKit 96T/48T 胶霉 HPLC≥98% 1mg
人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)试剂盒 Human lumican,LUM ELISA Kit 黄苷'单钠 HPLC≥98% 20mg
RatCiliaryNeuroophicFactor,CFELISAKit大鼠睫状神经营养因子(CF)ELISA试剂盒规格:96T/48T 磺胺甲基嘧啶 HPLC≥98% 100mg
10倍TBST浓缩缓冲清理溶液100毫升 磺胺甲氧哒嗪 HPLC≥98% 100mg
固定液的应用:
1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以pH7 2~7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1.单纯固定液
(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
(3)4%的多:主要用于培养细胞的固定。
2.混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效
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文献和实验Maxisorb 442404)Micro test tubes, 大头针或喷火枪药品试剂:(a) Buffer A-0(b) BSA标准品 (Bio-Rad, bovine serum albumin, 100 μg/mL)(c) 未知浓度样本 (unknown BSA, 0.8 mL, 由教师调配发给)(d) Dye Reagent (Bio-Rad 500-0006) 先以水稀释四倍备用。 以染料Coomassie brilliant blue G-250 配制的溶液,勿与胶体电泳染色用的CBR-250
大体积螯合物。因此减少蛋白质样品和BCA工作缓冲液的稀释比例应当保持反应的动力学并且保证标准曲线的工作范围能够覆盖到低蛋白浓度。 表1.蛋白标准品和BCA工作缓冲液体积比为20:1时,其中BSA标准品和BCA工作缓冲液的有效成分的浓度和摩尔量的比。 推荐的是1:1体积混合的BCA工作缓冲液和蛋白质样品,这里我们使用10ul蛋白质样品和10ulBCA工作液进行混合反应。大大减少蛋白质样品的稀释比例,并且也改变了BCA分析方法的动态范围,将检测浓度降低到0.01mg/ml. 我们修改了实验
Bromodeoxyuridine Staining of Mammary Tissue
Triton X-100 100mL PBS 40 mL DAB Solution DAB Stock - 3'-3' diaminobenzadine, 2.5 mg/mL in 0.1M PO4, pH7.6. Unactivated DAB - 1 mL DAB + 19 mL 0.1M PO4 +450 mL 1% aq. NiCl2, pH7.6. Activated DAB - 10 mL unactivated DAB + 23 mL 30% H2O2.
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