高效RIPA裂解液(组织/细胞)

产品参数：

产品名称	高效RIPA裂解液(组织/细胞)
英文名称	RIPA buffer(high)
货号	BH-DB001

产品名称：高效RIPA裂解液(组织/细胞)
别名    蛋白提取试剂盒
英文名称    RIPA buffer(high)
储存条件    附件PMSF-20℃，裂解液4℃。有效期1年
外观（性状）    黄色澄清液体
单位    瓶
本品为高效组织细胞裂解液。主要用于从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。组织活细胞本产品配有一支PMSF（0.3ml/1.5ml），PMSF请于-20℃保存。
使用说明
如发现RIPA有沉淀，请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
根据使用量，取每1ml RIPA 加入10ul PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。混匀备用 （PMSF现用现加）。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品： 把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。
用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项 ：
本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳；若想测定浓度，可入加少量 SDS（1%），煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
注意事项： 
 1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
 2、虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
 3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。
 4、本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
 5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
免疫球蛋白：

以下是公司正在熱銷的產品
类免疫缺陷病毒1型p24抗原    HIV-1 P24    Immunodeficiency Virus Type 1 p24    0.25    8    ng/mL    0.1
HLA II类组织相容性抗原DQalpha1    HLA-DQA1    HLA-DQA1    1    32    ng/mL    0.1
HLA-DPA1    HLA-DPA1    HLA-DPA1    25    800    pg/mL    1
HLA-DPB1    HLA-DPB1    HLA-DPB1    25    800    pg/mL    1
HLA-DR4抗原    HLA-DR4    HLA-DR4    25    800    pg/mL    1
H-ras    H-ras    H-ras    0.25    8    ng/mL    0.1
IFN-γR1-CDw119    IFN-γR1-CDw119    IFN-γR1-CDw119    25    800    pg/mL    1
II型胶原蛋白    Col II    Collagen TypeII    0.25    8    ng/mL    0.1
IκB激酶-α    IKKα    IKKα    37.5    1200    U/L    1
IκB激酶-β    IKKβ    IKKβ    25    800    U/L    1
I型胶原蛋白    ColⅠ    Collagen TypeⅠ    1.25    40    ng/mL    0.1
I型胶原羟基端肽β降解产物    β-CTX    β-CTX    12.5    400    pg/mL    1
I型原胶原N端前肽    PINP    N.Terminal Propeptide of type I Collagen    2.5    80    ng/mL    0.1
Jo1抗体;抗组氨酰tRNA合成酶抗体    Jo-1;HRS    Jo-1 Antibody    1.25    40    AU/mL    0.1
KIT Ligand    KITLG    KIT Ligand    25    800    pg/mL    1
Klotho蛋白    Klotho    Klotho    3.75    120    pg/mL    0.1
Klotho蛋白    Klotho    Klotho    0.5    16    pg/mL    0.1
L1细胞粘附分子    L1CAM    L1 cell adhesion molecule    0.5    16    ng/mL    0.1
Laminin-5;Epiligrin    Laminin-5;Epiligrin    Laminin-5;Epiligrin    0.25    8    ng/mL    0.1
L-精氨酸    L-Arg    L-Arginine    1.5625    50    ng/mL    0.1
L-乳酸    L-LA    L-lactic acid    1.5    48    μmol/L    0.1
L选择素    L-Selectin    L-Selectin    0.25    8    ng/mL    0.1
Mac-2结合蛋白    Mac-2BP     Mac-2BP    0.5    16    μg/mL    0.1
MEK激酶    MEK    MEK    15    480    pmol/L    1
MEST    MEST    Mesoderm-specific transcript homolog protein    3.75    120    ng/mL    0.1
microRNA-210    miR-210    microRNA-210    3.75    120    ng/mL    0.1
Spondin-2；mindin    Spondin-2    Spondin-2    3.125    100    ng/mL    0.1
MRP-14    MRP-14    Myeloid-related portein8;14    1.25    40    ng/mL    0.1
细菌生化鉴定    明胶 生化鉴定管    20支/盒
供鉴别测定细菌液化明胶用    明胶培养基(营养明胶)    250g
供鉴别测定细菌液化明胶用。(GB)    明胶培养基(营养明胶)    100g
供测定细菌液化明胶使用    明胶培养基(营养明胶)    100g
供测定细菌液化明胶使用(GB15979-2002和GB/T4789.28－2003 中3.10，GB/T4789.35－2003)。    明胶培养基(营养明胶)    100g
用于培养基、生物发酵的原材料    明胶胰酶消化物    25kg
每支添加于100mL的MRS琼脂培养基（027315）中    莫匹罗星锂盐（改良MRS培养基配套试剂）    10支/盒
用于培养基、生物发酵的原材料    木瓜蛋白酶大豆胨    25kg
细菌生化鉴定    木糖生化鉴定管    20支/盒
用于绿脓杆菌分解乙酰胺产氨试验。    纳氏试剂    10ml/瓶
用于绿脓杆菌分解乙酰胺产氨试验    钠氏试剂    10ml/支
用于鉴别奈瑟氏菌的利用糖源的能力。    奈瑟-果糖生化鉴定管    20支/盒
用于鉴别奈瑟氏菌的利用糖源的能力。    奈瑟-麦芽糖生化鉴定管    20支/盒
用于鉴别奈瑟氏菌的利用糖源的能力。    奈瑟-葡萄糖生化鉴定管    20支/盒
用于鉴别奈瑟氏菌的利用小牛血清的能力。    奈瑟-普通琼脂生化鉴定管    20支/盒
用于鉴别奈瑟氏菌的利用糖源的能力。    奈瑟-乳糖生化鉴定管    20支/盒
用于奈瑟氏菌属细菌生化鉴定    奈瑟氏菌属细菌生化鉴定盒    8种×10次/盒
用于鉴别奈瑟氏菌的利用硝酸盐的能力。    奈瑟-硝酸盐还原生化鉴定管    20支/盒
用于鉴别奈瑟氏菌的利用糖源的能力。    奈瑟-蔗糖生化鉴定管    20支/盒
每支添加于100ml（027053）中配成CN琼脂    萘啶酮酸(CN琼脂冻干配套试剂)    10支/盒
高效RIPA裂解液(组织/细胞)每支含萘啶酮酸1.5mg,添加于100ml（027053）中。    萘啶酮酸（CN琼脂配套试剂）    10支
广泛用于霉菌、酵母、细菌的培养，包括营养要求较高的微生物的培养，特别用于食品卫生微生物检验...    脑心浸出液肉汤（BHI）    100g
广泛用于霉菌、酵母、细菌的培养，包括营养要求较高的微生物的培养，特别用于食品卫生微生物检验...    脑心浸出液肉汤BHI    100g
广泛用于霉菌、酵母、细菌的培养，包括营养要求较高的微生物的培养，特别用于矿泉水和城市供水中...    脑—心浸萃琼脂培养基    100g
广泛用于霉菌、酵母、细菌的培养，包括营养要求较高的微生物的培养，特别用于饮用天然矿泉水和城...    脑—心浸萃液态培养基    100g
用于念珠菌特别是白色念珠菌的选择性分离和初步鉴别    念珠菌显色培养基    1000ml/瓶
操作步骤 ：
根据使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用（PMSF 现用现加）。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品： 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
温馨提示：
    工作液与浓缩液选择的技巧，以及各自的优势。
1，工作液的优势：工作液操作方便，降低实验操作步骤，对于要求无菌的实验，降低染菌风险。
2，浓缩液的优势：浓缩液成本相对较低，实验范围更广，对于不要求无菌的实验，可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高，保存更加稳定。