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39
- 英文名:
Ingenol Mebutate
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:细胞死亡诱导剂(IngenolMebutate)规格
英文名称:Ingenol Mebutate
产品规格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
发货周期:1~3天
IngenolMebutate(PEP005)存在于大戟植物的树液中,是细胞死亡诱导剂。
注本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号75567-37-2
别名Ingenol3-angelate;PEP005
纯度98.74%
分子式C₂₅H₃₄O₆
分子量430.53
储存条件-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
肉汤培养D250g用于食品中沙门氏菌检验前增菌培养
沙门氏菌显色培养B 25000 mL/瓶 incubation media 沙门氏菌显色培养B 25000 mL/瓶
半固体琼脂 250g 供细菌动力观察、菌种保存等用(GB 4789.4-2010和GB/T4789.8-2008)。
RV肉汤RappaportVassiliadisSalmonellaenrichmentbroth用于沙门氏菌选择性增菌培养。
TPY琼脂培养 250g 用于双岐杆菌分离培养(GB标准)
人神经系统周边细胞 (HPNC)( 5×105 ) 小鼠海马神经胶质细胞(EGFP标记) Mouse
CM-H084人脐静脉平滑肌细胞完全培养100mL
SERPINI1 Others Mouse 小鼠 SerpinI1 / Neuroserpin 人细胞裂解 (阳性对照)
L6565小鼠白血病克隆细胞系 L6565 murine leukemia cell line RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IL25 Protein Mouse 重组小鼠 IL25 蛋白 (His 标签)
小鼠角膜上皮细胞完全培养 100mL
2,5-Bis(4-aminophenyl)-1,3,4-oxadiazole 2425-95-8 质量规格:>98.0%(HPLC)
2-(2-Hydroxyphenyl)benzoxazole 835-64-3 质量规格:>98.0%(GC)(T)
5,6-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole 18392-81-9 质量规格:>98.0%(GC)
2-(2-Hydroxyphenyl)benzothiazole 3411-95-8 质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
1-Aminopyrene 1606-67-3 质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
1-Bromopyrene 1714-29-0 质量规格:>94.0%(GC)
4-Bromopyrene 1732-26-9 质量规格:>95.0%(GC)
1,6-Diaminopyrene 14923-84-3 质量规格:>98.0%(HPLC)(N)
1,3-Diaminopyrene 92821-64-2 质量规格:
2,7-Di-tert-butylpyrene 24300-91-2 质量规格:>98.0%(GC)
1-Nitropyrene 5522-43-0 质量规格:>98.0%(GC)
4-Nitropyrene 57835-92-4 质量规格:>97.0%(HPLC)
2-Aminofluorene 153-78-6 质量规格:>97.0%(T)
2-Amino-9-fluorenone 3096-57-9 质量规格:>98.0%(HPLC)
2-Amino-9,9-dimethylfluorene 108714-73-4 质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
细胞死亡诱导剂(IngenolMebutate)规格98%≥99%1gSCdiosbulbin-BAnti-NOX4/NADPH oxidase 4 NADPH化酶NOX家族的成员4抗体Anti-NOX4/NADPH oxidase 4 NADPH化酶NOX家族的成员4抗体48T/96T
98%≥99%5gsFRP1ThermopsineAnti-Nanog 胚胎干细胞关键蛋白抗体Anti-Nanog 胚胎干细胞关键蛋白抗体48T/96T
98%97%100gsIgAAstragaloside IAnti-NAIF1 protein 核凋亡诱导子蛋白1Anti-NAIF1 protein 核凋亡诱导子蛋白148T/96T
操作步骤(仅供参考):
1、细胞死亡诱导剂(IngenolMebutate)规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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。前者可直接将两亲本细胞混合培养,后者需制成一定浓度的细胞悬浮液。 (2)细胞融合,加促融因子于将行融合的细胞之中,诱导融合。 (3)杂种细胞选择。利用选择性培养基等,使亲本细胞死亡,而让杂种细胞存活。 (4)杂种细胞克隆 。对选出的杂种细胞进行克隆 (选择与纯化),经过培养,就能获得所需要的无性繁殖系。 同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合;异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。 诱导
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