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- 2025年07月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
44
- 英文名：
Maximov Fixative Solution
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
250mL
1、Maximov固定液说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Maximov固定液说明书
英文名称：Maximov Fixative Solution
产品规格：250mL
发货周期：1～3天
本固定液主要成分为化汞、重酸钾、甲醛。与Zenker固定液相比，本产品不含铬酸，所以重酸钾未被酸化，因此，对细胞浆固定较好。甲醛有促染胞浆的作用，增加对酸性染料的亲和力。
储存条件常温运输和保存，有效期一年。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
大鼠血管性血友病子/瑞斯托辅子VWF定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠凝血子ⅩFⅩ定量检测试剂盒 免疫测定
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大鼠凝血子Ⅷ相关抗原FⅧAg定量检测试剂盒 免疫测定
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大鼠前列腺性酶（PAP)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat PAP ELISA Kit
大鼠游离前列腺特异性抗原(FREE PSA)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat FREE PSA ELISA Kit
大鼠前列腺特异性抗原(PSA)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat PSA ELISA Kit
大鼠卵巢癌标志物(CA125)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat CA125 ELISA Kit
大鼠癌标志物(CA153)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat CA153 ELISA Kit
Maximov固定液说明书 化β 连环素蛋白抗体 IL-31 ELISA Kit 白介素31(IL-31)ELISA试剂盒
印 订购|咨询 规格 HPLC≥98%，20mg/vial
化β 连环素蛋白抗体 IL-3 ELISA Kit 白介素3(IL-3)ELISA试剂盒
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造血干细胞抗原抗体CD133抗体 IL2R ELISA Kit 白介素2受体(IL2R)ELISA试剂盒
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1号染色体开放阅读框138抗体 IL-2sRβ ELISA Kit 白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)ELISA试剂盒
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6号染色体开放阅读框50抗体 IL-2sRα/CD25 ELISA Kit 白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒
藜芦 订购|咨询 规格 20mg
1号染色体开放阅读框151抗体 IL-29 ELISA Kit 白介素29(IL-29)ELISA试剂盒
去胆 订购|咨询 规格 20mg
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文献和实验1. 标本固定——不仅仅是「切一切」和「泡一泡」温柔地取材：大刀阔斧取材的同时，视组织如珍宝，莫挤压组织，轻柔取材和镊取。尽量避开坏死区域。太大太厚的组织不利于均匀一致的固定，实质组织取材厚度应小于 5 mm。新鲜的固定液： 固定液 10% 中性缓冲福尔马林 (NBF) 需新鲜配置，商用型固定液注意其标注的有效期，避免使用过期变质的固定液。充分及时地固定：固定液要充足，其与组织的体积比最好大于等于 20 倍；取材后即刻固定。固定时需将瓶口封住，避免甲醛挥发。组织的固定时间不宜过长，一般过夜（12～24
。 Q：检测凋亡用的细胞能否固定？ A：甲醛固定液会造成结果假阳性，因此用于 Annexin V 凋亡检测的细胞不能进行固定。 需要注意的是，Annexin V 检测的样本为外周血时，勿使用含有多聚甲醛等固定液成分的红细胞裂解液来处理细胞。 Q：有没有更好的办法处理贴壁细胞，来做流式凋亡实验？ A：检测贴壁细胞时，若消化时间不易控制，建议用 Accutase 细胞消化液，对细胞损伤小且不会改变细胞膜上 PS 的分布。 Q：Annexin V 系列有很多种不同组合试剂盒，该如何选
光小点，即为支原体的DNA染色斑，说明有支原体污染。 二、试剂盒组分： 1、Hoechst33258工作液50ml 2、固定液50ml 3、封固液10ml 4、说明书1份 三、未提供的设备及耗材： 1、荧光显微镜 2、6孔细胞培养板 3、22×22mm盖玻片 4、载玻片 四、操作步骤： （一）、贴壁细胞： 1、被检细胞接种在无菌的6孔细胞培养板中，接种
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