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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
36
- 英文名：
Zenker Fixative Solution
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
250mL
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Zenker固定液说明书
英文名称：Zenker Fixative Solution
产品规格：250mL
发货周期：1～3天
Zenker固定液是常用的混合型固定液，是细胞学及病理学常用的固定剂之一，由酸钾、生汞、酸和水混合而成。用该固定液固定的组织，细胞核及细胞浆染色十分清晰，特别是要显示免疫球蛋白、病毒包涵体(如Negri小体)、骨骼肌的横纹等组织时，应用本液可获得良好的结果。
产品特点
1．Zenker固定液对细胞核固定效果较好，较适合于造血和网状内皮组织等样品的固定。
2．Zenker固定液不能用于保存细胞颗粒，红细胞及含铁血黄素。对含血量较多的组织标本不建议使用Zenker液固定。
3．常作为三色染色的组织固定剂，在三色染色中还作为媒染剂使用。
4．固定时间一般需要12-24小时。
产品组成
成分
溶液A
溶液B
说明书
储存条件常温运输和保存，有效期一年。
使用方法
1．配制适量体积的Zenker固定液，按照191的比例将溶液A和溶液B混合，搅拌均匀，所得溶液即为Zenker固定液工作液。注Zenker固定液工作液建议即配即用。
2．标本修块，置入Zenker固定液工作液内固定12～24h(根据样品材料、大小不同，固定时间可能会有较大差异)。
3．固定后，用流水冲洗12h，或者亚硫酸钠溶液冲洗，也可用1%的水溶液洗涤。在70%酒精脱水时加入(配成0.5%酒)脱汞。
4．常规方法脱水、透明。
注意事项
1．由于Zenker固定液中含化汞，固定后必须脱汞。
2．固定后，组织必须用流水冲洗去除重络酸钾否则乙醇脱水会引起络显色。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
大鼠水通道蛋白3AQP3定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠水通道蛋白4AQP4定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠水通道蛋白5AQP5定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠组织子途径抑制物TFPI定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠脂酶A2PLA2定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠血红素合酶HO定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠酶(Methylase)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat Methylase ELISA Kit
大鼠增殖细胞抗原(PCNA)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat PCNA ELISA Kit
大鼠脂蛋白脂酶(LPL)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat Lamina Propria Lymphocyte ELISA Kit
大鼠抗性酶5b(TRACP5b)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat tartRateresistant acid phosphatase orm 5b ELISA Kit
大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒ELISA试剂盒 Rat Glucosedependent insulinreleasing polypeptide ELISA Kit
大鼠糖原酶同工酶II（GPII)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat Glycogen phosphorylase II ELISA Kit
大鼠糖原酶同工酶MM（GPMM)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat Glycogen phosphorylase MM ELISA Kit
Zenker固定液说明书 化Connexin 43蛋白抗体 mIgM ELISA Kit 表面膜免球蛋白M(mIgM)ELISA试剂盒
异 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
丝切蛋白抗体 mIgD ELISA Kit 表面膜免球蛋白D(mIgD)ELISA试剂盒
11-羰-Β-酰香 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
化周期素B1抗体 SP-D ELISA Kit 表面活性蛋白D(SP-D)ELISA试剂盒
芹菜素-7-O-葡萄糖苷 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
化皮层肌动蛋白抗体 mIgA ELISA Kit 表面膜免球蛋白A(mIgA)ELISA试剂盒
三十醇 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
化周期素B1抗体 SP-A ELISA Kit 表面活性蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒
3-O-没食子酰粘 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
化cyclin D1抗体 RCAS1 ELISA Kit 表达于SiSo细胞系的受体结合型肿瘤抗原(RCAS1)ELISA试剂盒
苦龙胆酯苷 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;10mg
CD13肽酶N抗体 MN ELISA Kit 变(MN)ELISA试剂盒
己雌 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;100mg
巨噬细胞炎性蛋白MIP-3a抗体 flagellin ELISA Kit 鞭蛋白(flagellin)ELISA试剂盒
蜂斗菜内酯A 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
操作步骤(仅供参考)：
1、Zenker固定液说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Zenker固定液说明书
英文名称：Zenker Fixative Solution
产品规格：250mL
发货周期：1～3天
Zenker固定液是常用的混合型固定液，是细胞学及病理学常用的固定剂之一，由酸钾、生汞、酸和水混合而成。用该固定液固定的组织，细胞核及细胞浆染色十分清晰，特别是要显示免疫球蛋白、病毒包涵体(如Negri小体)、骨骼肌的横纹等组织时，应用本液可获得良好的结果。
产品特点
1．Zenker固定液对细胞核固定效果较好，较适合于造血和网状内皮组织等样品的固定。
2．Zenker固定液不能用于保存细胞颗粒，红细胞及含铁血黄素。对含血量较多的组织标本不建议使用Zenker液固定。
3．常作为三色染色的组织固定剂，在三色染色中还作为媒染剂使用。
4．固定时间一般需要12-24小时。
产品组成
成分
溶液A
溶液B
说明书
储存条件常温运输和保存，有效期一年。
使用方法
1．配制适量体积的Zenker固定液，按照191的比例将溶液A和溶液B混合，搅拌均匀，所得溶液即为Zenker固定液工作液。注Zenker固定液工作液建议即配即用。
2．标本修块，置入Zenker固定液工作液内固定12～24h(根据样品材料、大小不同，固定时间可能会有较大差异)。
3．固定后，用流水冲洗12h，或者亚硫酸钠溶液冲洗，也可用1%的水溶液洗涤。在70%酒精脱水时加入(配成0.5%酒)脱汞。
4．常规方法脱水、透明。
注意事项
1．由于Zenker固定液中含化汞，固定后必须脱汞。
2．固定后，组织必须用流水冲洗去除重络酸钾否则乙醇脱水会引起络显色。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
大鼠水通道蛋白3AQP3定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠水通道蛋白4AQP4定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠水通道蛋白5AQP5定量检测试剂盒 免疫测定
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大鼠糖原酶同工酶II（GPII)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat Glycogen phosphorylase II ELISA Kit
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操作步骤(仅供参考)：
1、Zenker固定液说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验相关实验
Mallory氏磷钨酸苏木素染法(简称P、T、A) 操作方法： （1）固定于Zenker氏固定液的组织，如系10%甲醛固定的组织切片，可再经Zenker氏液处理，如不处理亦可染色，但其结果欠佳 （2）石蜡切片如系Zenker氏液固定的组织，或曾经Zenker氏液处理过的切片，在染色之前需经0.5%碘酒精脱汞，水洗后再经0.5%硫代硫酸钠的脱碘。 （3）经 蒸馏 水洗后，将切片置于0.25%高锰酸钾溶液中5分钟。 （4）经 蒸馏 水洗
1. 标本固定——不仅仅是「切一切」和「泡一泡」温柔地取材：大刀阔斧取材的同时，视组织如珍宝，莫挤压组织，轻柔取材和镊取。尽量避开坏死区域。太大太厚的组织不利于均匀一致的固定，实质组织取材厚度应小于 5 mm。新鲜的固定液： 固定液 10% 中性缓冲福尔马林 (NBF) 需新鲜配置，商用型固定液注意其标注的有效期，避免使用过期变质的固定液。充分及时地固定：固定液要充足，其与组织的体积比最好大于等于 20 倍；取材后即刻固定。固定时需将瓶口封住，避免甲醛挥发。组织的固定时间不宜过长，一般过夜（12～24
。 Q：检测凋亡用的细胞能否固定？ A：甲醛固定液会造成结果假阳性，因此用于 Annexin V 凋亡检测的细胞不能进行固定。 需要注意的是，Annexin V 检测的样本为外周血时，勿使用含有多聚甲醛等固定液成分的红细胞裂解液来处理细胞。 Q：有没有更好的办法处理贴壁细胞，来做流式凋亡实验？ A：检测贴壁细胞时，若消化时间不易控制，建议用 Accutase 细胞消化液，对细胞损伤小且不会改变细胞膜上 PS 的分布。 Q：Annexin V 系列有很多种不同组合试剂盒，该如何选
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